一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>

1、進(jìn)一步了解和熟悉紫外-分光光度計(jì)的原理和結(jié)構(gòu)，以美析UV-1700PC為例學(xué)習(xí)紫外分光光度計(jì)的操作。

2、掌握利用紫外分光光度法測定苯甲酸和山梨酸的吸收光譜圖。

3、掌握標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定樣品中苯甲酸和山梨酸及其鈉鹽和鉀鹽的含量。

二、實(shí)驗(yàn)原理

為了防止食品在儲存、運(yùn)輸過程中發(fā)生腐蝕、變質(zhì)，常在食品中添加少量防腐劑。防腐劑使用的品種和用量在食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中都有嚴(yán)格的規(guī)定，苯甲酸和山梨酸及其鈉鹽、鉀鹽是食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)允許使用的主要防腐劑之一。

苯甲酸具有芳香結(jié)構(gòu)，在波長225nm和272nm處有K吸收帶和B吸收帶。根據(jù)苯甲酸（鈉）在225nm處有大吸收，測得其吸光度即可用標(biāo)準(zhǔn)曲線法求出樣品中苯甲酸的含量。山梨酸具有α,β-不飽和羰基結(jié)構(gòu)，在波長255nm處有π—π*躍遷的K吸收帶，因此可根據(jù)它們的紫外吸收光譜特征可以對它們進(jìn)行定性鑒定和定量測定。

由于食品中防腐劑用量很少，GB2760-2011 規(guī)定0.2-1.5g/kg，并且食品樣品中其它的成分也可能對防腐劑的測定具有干擾作用，因此一般可預(yù)先將樣品中的防腐劑與其它成分進(jìn)行分離，再經(jīng)過提純和濃縮進(jìn)行測定。常用的分離方法包括蒸餾法和溶劑萃取法等。

本實(shí)驗(yàn)采用溶劑萃取法，先用HCl溶液將樣品進(jìn)行酸化，再利用乙醚將這兩種防腐劑品從樣品中萃取出來，然后將乙醚蒸發(fā)，剩下的萃取物經(jīng)過堿性溶液（NaOH）溶解與處理。后對照標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，利用紫外分光光度計(jì)對目的成分進(jìn)行檢測。

三、實(shí)驗(yàn)儀器和試劑

1.紫外可見分光光度計(jì) UV-1700PC（上海美析儀器），25px石英比色皿，50mL容量瓶。

2.HCl溶液（1:1）、NaOH溶液（40g/L）、NaCl溶液（5%）。

3.苯甲酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

（1）苯甲酸鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液（1.000g/L）：準(zhǔn)確稱量經(jīng)過干燥的苯甲酸鈉1.000g（105℃干燥處理2h）于1000mL容量瓶中，用適量的蒸餾水溶解后定容。該貯備液可置于冰箱保存一段時(shí)間。

（2）苯甲酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（32mg/L）：準(zhǔn)確移取苯甲酸鈉儲備液32.00mL于1000mL容量瓶中，加入蒸餾水稀釋定容。

（3）系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：分別準(zhǔn)確移取苯甲酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液0.50mL、1.00mL、1.50mL 、2.00mL和2.50mL于5個(gè)10mL容量瓶中，用NaOH溶液稀釋定容。得到濃度分別為1.6 mg/L、3.2 mg/L、4.8 mg/L、6.4 mg/L和8.0 mg/L的苯甲酸鈉系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4.山梨酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

（1）山梨酸鉀標(biāo)準(zhǔn)貯備液（1.000g/L）：準(zhǔn)確稱量經(jīng)過干燥的山梨酸鈉1.000g（105℃干燥處理2h）于1000mL容量瓶中，用適量的蒸餾水溶解后定容。該貯備液可置于冰箱保存一段時(shí)間。

（2）山梨酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液（16mg/L）：準(zhǔn)確移取山梨酸鉀儲備液16.00mL于1000mL容量瓶中，加入蒸餾水稀釋定容。

（3）系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：分別準(zhǔn)確移取山梨酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液0.50mL、1.00mL、1.50mL 、2.00mL和2.50mL于5個(gè)10mL容量瓶中，用NaOH溶液稀釋定容。得到濃度分別為0.8mg/L、1.6 mg/L、2.4 mg/L、3.2 mg/L和4.0 mg/L的山梨酸鉀系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。

四、樣品處理

液體樣品：醬油 、食醋取5mL，飲料取10mL于125mL分液漏斗中，加入鹽酸溶液2mL進(jìn)行酸化，用無水乙醚萃取三次，每次30mL，每次振搖1min。合并乙醚層于250mL分液漏斗中，用NaCl溶液洗滌2次，每次5-10mL。然后用索氏抽提器回收乙醚，用NaOH溶液溶解，定容至100mL備用 。

若用雪碧等碳酸飲料可直接移取飲料1.5ml于50mL容量瓶中，用超聲脫氣5min驅(qū)趕二氧化碳后，用NaOH稀釋定容備用。

五、實(shí)驗(yàn)步驟略

六、關(guān)于我們

上海美析儀器有限公司(以下簡稱美析)，是一家具有自主知識產(chǎn)權(quán)的高新技術(shù)企業(yè)，美析的創(chuàng)業(yè)理念“科技——因你改變”，并以此為企業(yè)宗旨，不斷探究、果敢創(chuàng)新。特別是在分析測試儀器域，不斷開發(fā)出先進(jìn)的產(chǎn)品，使美析成為優(yōu)質(zhì)儀器資源的供應(yīng)者。

      美析主營光譜類儀器可見分光光度計(jì)、紫外可見分光光度計(jì)、原子吸收光譜儀、超微量分光光度計(jì)、原子熒光光度計(jì)、ICP電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀、ICP電感耦合等離子體質(zhì)譜儀，目，我們的產(chǎn)品已廣泛應(yīng)用于有機(jī)化學(xué)、無機(jī)化學(xué)、生物化學(xué)、醫(yī)藥、環(huán)保、冶金、石油、農(nóng)業(yè)等域。同時(shí)美析利用在產(chǎn)品機(jī)械結(jié)構(gòu)、光學(xué)設(shè)計(jì)、電氣應(yīng)用和軟件開發(fā)方面積累的豐富經(jīng)驗(yàn)，結(jié)合市場的新實(shí)際需求，近期將陸續(xù)推出一批全新的分析類儀器。 

美析的總部及生產(chǎn)基地設(shè)在上海，營銷中心設(shè)在北京，并在江蘇、上海、山東三地建有研發(fā)基地。為充分利用各地的智力資源，美析與國內(nèi)外的部分科研單位也進(jìn)行了深層次的科研合作，不斷將科研成果轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)力。為更好的服務(wù)于廣大客戶，美析儀器國內(nèi)設(shè)有12家辦事機(jī)構(gòu)，度身定制符合您需求的應(yīng)用解決方案，提高產(chǎn)品的附加值。在不斷服務(wù)國內(nèi)用戶的同時(shí)，美析也與20多個(gè)國家的分銷機(jī)構(gòu)建立了深度的戰(zhàn)略合作關(guān)系。