為促進國內(nèi)相關(guān)領(lǐng)域的研究進展,上海閃晶分子生物科技有限公司從2008年開始,對國內(nèi)實驗室開展重組腺病毒/慢病毒構(gòu)建,包裝及擴增服務(wù),可以由客戶提供自己的基因,完成腺病毒/慢病毒構(gòu)建,鑒定,包裝的服務(wù).我們的宗旨是:“專業(yè)公司,打造專業(yè)服務(wù)”

一.   技術(shù)路線:

（一） A. 腺病毒載體構(gòu)建:

本系統(tǒng)是以Ad5血清型E1/E3缺陷型腺病毒DNA為架,在克隆,包裝,擴增等各部條件做了改進和優(yōu)化,達到了克隆陽性率更高,質(zhì)量更可靠,包裝穩(wěn)定,出毒迅速,滴度高等效果.在此基礎(chǔ)上,還拓展了更廣泛的應(yīng)用,可以提供各種帶報告基因的,帶不同標簽的腺病毒構(gòu)建和包裝服務(wù).所包裝的腺病毒已成功應(yīng)用于信號轉(zhuǎn)導(dǎo),基因轉(zhuǎn)位,Co-IP,干細胞研究等科研實驗.并且可以完成較高難度的克隆構(gòu)建,包括具有細胞毒性作用基因的腺病毒構(gòu)建,在短時間內(nèi)完成從原始質(zhì)粒到病毒DAN的構(gòu)建工作.

B.慢病毒載體構(gòu)建

慢病毒（Lent Virus）載體是以HIV-1（人類免疫缺陷I型病毒）為基礎(chǔ)發(fā)展起來的基因治療載體,該載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上,達到持久性表達的效果.可有效地感染神經(jīng)元肝細胞,心肌細胞,腫瘤細胞,內(nèi)皮細胞,干細胞等多種類型的細胞,效果非常理想,因此具有廣闊的應(yīng)用前景.

（二）              病毒包裝、擴增:

1.） 將鑒定正確的基因克隆到慢病毒載體,與輔助載體一起轉(zhuǎn)染293T細胞進行包裝;

2.） 將包裝好的病毒超速離心收集;

3.）    將濃縮病毒進行滴定,滴定結(jié)果單位為PFU/ml（一般為5*108PFU/ml以上,體積為500µl以上,根據(jù)客戶需要,不同量有價格差異）

二、質(zhì)量控制與鑒定:

1.）測序鑒定                                                              

2.）根據(jù)特定引物作RT-PCR鑒定

3.）蛋白表達鑒定（根據(jù)客戶要求并由客戶提供高特異性抗體）