一、目的
脂肪廣泛存在于許多植物的種子和果實(shí)中,測(cè)定脂肪的含量,可以作為鑒別其品質(zhì)優(yōu)劣的一個(gè)指標(biāo).脂肪含量的測(cè)定有很多方法,如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、電測(cè)和核磁共振法等.目前國(guó)內(nèi)外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法（Soxhlet extractor method）是公認(rèn)的經(jīng)典方法,也是我國(guó)糧油分折首選的標(biāo)準(zhǔn)方法.通過(guò)本實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí),掌握索氏抽提法測(cè)定粗脂肪含量的原理和操作方法.
二、原理
本實(shí)驗(yàn)采用索氏抽提法中的殘余法,即用低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑（乙醚或石油醚）回流抽提,除去樣品中的粗脂肪,以樣品與殘?jiān)�重量之�?計(jì)算粗脂肪含量.由于有機(jī)溶劑的抽提物中除脂肪外,還或多或少含有游離脂肪酸、甾醇、磷脂、蠟及色素等類脂物質(zhì),因而抽提法測(cè)定的結(jié)果只能是粗脂肪.
三、實(shí)驗(yàn)材料、主要儀器和試劑
1、實(shí)驗(yàn)材料
油料作物種子、中速濾紙
2、儀器：

1）索氏脂肪抽提器（圖1）或YG-Ⅱ型油分測(cè)定器
2）干燥器（直徑15-18cm,盛變色硅膠）
3）不銹鋼鑷子（長(zhǎng)20cm）
4）培養(yǎng)皿
5）分析天平（感量0.001g）
6）稱量瓶
7）恒溫水浴
8）烘箱
9）樣品篩（60 目）
3、試劑
無(wú)水乙醚或低沸點(diǎn)石油醚（A.R.）

四、操作步驟
1、準(zhǔn)備工作
將濾紙切成8cm×8cm,疊成一邊不封口的紙包,用硬鉛筆編寫順序號(hào),按順序排列在培養(yǎng)皿中.將盛有濾紙包的培養(yǎng)皿移入105±2℃烘箱中干燥2h,取出放入干燥器中,冷卻至室溫.按順序?qū)⒏鳛V紙包放人同一稱量瓶中稱重（記作a）、稱量時(shí)室內(nèi)相對(duì)濕度必須低于70%.
2、包裝和干燥
在上述已稱重的濾紙包中裝入3g 左右研細(xì)的樣品,封好包口,放入105±2℃的烘箱中干燥3h,移至干燥器中冷卻至室溫.按順序號(hào)依次放入稱量瓶中稱重（記作b）.
3、抽提
將裝有樣品的濾紙包用長(zhǎng)鑷子放入抽提筒中,注入一次虹吸量的1.67 倍的無(wú)水乙醚,使樣品包完全浸沒(méi)在乙醚中.連接好抽提器各部分,接通冷凝水水流,在恒溫水浴中進(jìn)行抽提,調(diào)節(jié)水溫在70-80℃之間,使冷凝下滴的乙醚成連珠狀（120-150 滴/min 或回流7次/h 以上）,抽提至抽取筒內(nèi)的乙醚用濾紙點(diǎn)滴檢查無(wú)油跡為止（約需6-12h）.抽提完畢后,用長(zhǎng)鑷子取出濾紙包,在通風(fēng)處使乙醚揮發(fā)（抽提室溫以 12-25℃為宜）.提取瓶中的乙醚另行回收.
4、稱重
待乙醚揮發(fā)之后,將濾紙包置于105±2℃烘箱中干燥2h,放入干燥器冷卻至恒重為止（記作c）.
五、結(jié)果與計(jì)算

式中：
a:稱量瓶加濾紙包重（g）
b:稱量瓶加濾紙包和烘干樣重（g）
c:稱量瓶加濾紙包和抽提后烘干殘?jiān)�重（g）
六、附注
1）測(cè)定用樣品、抽提器、抽提用有機(jī)溶劑都需要進(jìn)行脫水處理.
這是因?yàn)椋旱谝?抽提體系中有水,會(huì)使樣品中的水溶性物質(zhì)溶出,導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果偏高；第二,抽提體系中有水,則抽提溶劑易被水飽和（尤其是乙醚,可飽和約2%的水）,從而影響抽提效率；第三,樣品中有水,抽提溶劑不易滲入細(xì)胞組織內(nèi)部,結(jié)果不易將脂肪抽提干凈.
2）試樣粗細(xì)度要適宜.試樣粉末過(guò)粗,脂肪不易抽提干凈；試樣粉末過(guò)細(xì),則有可能透過(guò)濾紙孔隙隨回流溶劑流失,影響測(cè)定結(jié)果.
3）索氏抽提法測(cè)定脂肪最大的不足是耗時(shí)過(guò)長(zhǎng),如能將樣品先回流1-2 次,然后浸泡在溶劑中過(guò)夜,次日再繼續(xù)抽提,則可明顯縮短抽提時(shí)間.
4）YG-Ⅱ型油分測(cè)定器容量大,適合于樣品較多的選種鑒定工作使用,溫度控制在70℃左右,8h 可提取完畢.
5）必須十分注意乙醚的安全使用.抽提室內(nèi)嚴(yán)禁有明火存在或用明火加熱.乙醚中不得含有過(guò)氧化物,保持抽提室內(nèi)良好通風(fēng),以防燃爆.乙醚中過(guò)氧化物的檢查方法是：取適量乙醚,加入碘化鉀溶液,用力搖動(dòng),放置1min,若出現(xiàn)黃色則表明存在過(guò)氧化物,應(yīng)進(jìn)行處理后方可使用.處理的方法是：將乙醚放入分液漏斗,先以1/5 乙醚量的稀KOH溶液洗滌2-3 次,以除去乙醇；然后用鹽酸酸化,加入1/5 乙醚量的FeSO4 或Na2SO3 溶液,振搖,靜置,分層后棄去下層水溶液,以除去過(guò)氧化物；最后用水洗至中性,用無(wú)水CaCl2 或無(wú)水Na2SO4 脫水,并進(jìn)行重蒸餾.