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標(biāo)題人乙型肝炎表面抗原,人ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作

   

提供者:上海滬宇生物科技有限公司    發(fā)布時(shí)間:2012/6/15   閱讀次數(shù):466次 >>進(jìn)入該公司展臺(tái)

試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA試劑盒.已知HBSAG濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品 加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將HBSAG和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中HBSAG的濃度呈比例關(guān)系。

 

操作步驟

1.   使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。

2.   根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

3.   加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。

4.   甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

5.   每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。

6.   甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

7.   每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘。避免光照。

8.   取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。

9.   在450nm波長處測(cè)定各孔的OD值。
 

 

上海滬宇生物有限公司將進(jìn)一步加強(qiáng)人才經(jīng)營、產(chǎn)品經(jīng)營,不斷提升企業(yè)的核心竟?fàn)幜,?shí)現(xiàn)具有高科技產(chǎn)業(yè)體系、知識(shí)化創(chuàng)業(yè)團(tuán)隊(duì)的國際化的公司,服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域,迎接世界經(jīng)濟(jì)一體化所帶來的機(jī)遇與挑戰(zhàn)。

 

 

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