【摘要】 目的以綠原酸的含量為指標(biāo)，測定評價(jià)川渝所產(chǎn)忍冬藤的質(zhì)量。方法采用分光光度法測定。結(jié)果測定了川渝6種忍冬藤中綠原酸的含量。結(jié)論該方法簡便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好。其結(jié)果可對川渝產(chǎn)忍冬藤的合理用藥、質(zhì)量控制及進(jìn)一步開發(fā)提供參考。

　　【關(guān)鍵詞】 忍冬藤； 綠原酸； 分光光度法

　　忍冬藤Caulis Lonicerae為常用中藥，具有清熱解毒,疏風(fēng)通絡(luò)的功效。2005年版《中國藥典》規(guī)定忍冬藤為忍冬科Caprifoliaceae植物忍冬Lonicera japonica Thunb.的干燥莖枝［1］。但在實(shí)際使用中，多種金銀花原植物的藤莖（即莖枝）在不同的區(qū)域以中藥忍冬藤入藥�！吨腥A本草》記載忍冬藤的來源有忍冬科植物忍冬L. japonica Thunb.、山銀花L. confusa DC.、紅腺忍冬L. hypoglauca Miq.、黃褐毛忍冬L. fulvotomentosa Hsu et S. G.Ｃheng等的莖枝［2］。據(jù)作者調(diào)研，川渝忍冬藤品種也很復(fù)雜。本實(shí)驗(yàn)對川渝主要的6種金銀花原植物的藤莖用分光光度法進(jìn)行了有效成分綠原酸的含量測定，以期對川渝產(chǎn)忍冬藤的質(zhì)量控制和開發(fā)提供參考。

　　1 儀器、試劑和樣品

　　Lambda35分光光度計(jì)（Perkin Elmer），TCQ-250超聲波清洗器（北京醫(yī)療設(shè)備二廠），Sartrorius BP211D 1/10萬電子分析天平，ZK-82B型電熱真空干燥箱。綠原酸對照品（中國藥品生物制品檢定所提供，80℃減壓干燥至恒重），蒸餾水，分析純甲醇。

　　實(shí)驗(yàn)材料為成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院萬德光教授通過原植物分類學(xué)鑒定的6種干燥忍冬藤莖。

　　2 方法與結(jié)果

　　2.1 對照品溶液的制備精密稱取綠原酸對照品5.87 mg，置于100 ml容量瓶中，甲醇定容，搖勻，配制成58.70 μg/ml的綠原酸溶液。

　　2.2 測定波長的選擇將對照品溶液和供試品溶液在200～400 nm進(jìn)行掃描，其均在327 nm波長處有最大吸收，故檢測波長選擇為327 nm。

　　2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制及線性范圍精密吸取綠原酸對照品溶液1，4，8，12，15，20 ml，分別置于50 ml容量瓶中，甲醇定容，搖勻，配制成1.174，4.696，9.392，14.088，17.610，23.480 μg/ml的綠原酸溶液，以甲醇作空白對照，在327 nm波長處測吸收度。以吸收度（A）對進(jìn)樣濃度（M）進(jìn)行回歸，得綠原酸線性回歸方程為A=0.039 76M-0.002 7，r=0.999 9 ，線性范圍為1.174～23.480 μg/ml。

　　2.4 供試品溶液的制備精密稱取藥材細(xì)粉約0.5 g，加甲醇定容于25 ml容量瓶中，超聲30 min,放置至室溫，滴加甲醇至25 ml，搖勻，精密吸取1 ml上清液用甲醇定溶于25 ml容量瓶中，稀釋倍數(shù)為1 250，作為藥材供試品溶液。

　　2.5 精密度實(shí)驗(yàn)將1號樣品制成的供試品溶液，按標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下操作重復(fù)測定6次，RSD為0.31%（n=6），說明精密度良好。

　　2.6 重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn) 精密稱取6份同一樣品（1號），各約0.5 g，按供試品溶液制備項(xiàng)下進(jìn)行制備，按標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下操作測定，RSD為1.08%（n=6），說明重現(xiàn)性好。

　　2.7 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)對1號供試品溶液在0，1，2，3，4，5 h按標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下操作各測定1次，RSD=0.74%（n=6），說明樣品溶液在5 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

　　2.8 回收率實(shí)驗(yàn)采用加樣回收法。精密稱定6份1號樣品各約0.25 g，分別精密加入綠原酸對照品0.25，0.50，1.00 mg（3水平共6份），按供試品溶液制備項(xiàng)下進(jìn)行制備，按標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下操作。結(jié)果見表1。

　　表1 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果（略）

　　2.9 樣品測定按供試品溶液制備項(xiàng)下進(jìn)行制備，按標(biāo)準(zhǔn)曲線項(xiàng)下操作測定，從回歸方程求得綠原酸的質(zhì)量，再計(jì)算出忍冬藤中綠原酸的含量。結(jié)果見表2。

　　3 小結(jié)與討論

　　3.1 供試品溶液和對照品綠原酸溶液的紫外掃描圖譜在250 nm～400 nm范圍內(nèi)一致，證明本實(shí)驗(yàn)所用測定方法確實(shí)可行。為了保證測試結(jié)果的可比性，材料來源全為植株從上往下數(shù)第5～15節(jié)之間的藤莖，未采集木栓層已脫落的老藤。所測結(jié)果綠原酸含量在0.43%～2.22%之間，相差5倍，主要集中在0.66%～1.22%之間。

　　表2 忍冬藤中綠原酸含量（略）

　　3.2 2005年版《中國藥典》首次規(guī)定了用HPLC法測定忍冬藤中綠原酸的含量，并且要求其含量不少于0.1%。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果遠(yuǎn)高于《中國藥典》中的限量要求,這是由于金銀花中有綠原酸的幾種異構(gòu)體［3］，其原植物忍冬藤中也應(yīng)該含綠原酸的幾種異構(gòu)體，分光光度法可測定其總含量［4］，所以本實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果實(shí)為綠原酸類的總含量。