摘要

　　采用反相HPLC法，以醋酸氟氫松為內(nèi)標(biāo)，在氰基柱上以水—甲醇—乙腈—三乙胺（80∶20∶20∶1.4，用磷酸調(diào)整pH為7.5）為流動相，檢測波長為254nm，同時測定復(fù)方敏立通片中馬來酸氯苯那敏和倍他米松的含量。方法簡便，快速準確，各組分與內(nèi)標(biāo)有良好線性關(guān)系和分離度。平均回收率馬來酸氯苯那敏為99.2％（RSD＝0.7％），倍他米松為100.9％（RSD＝0.6％），n=7。關(guān)鍵詞：HPLC法馬來酸氯苯那敏倍他米松醋酸氟氫松復(fù)方敏立通片復(fù)方敏立通片由馬來酸氯苯那敏（2mg）和倍他米松（0.25mg）組成，具有消炎、抗過敏等藥理作用。香港麒麟藥廠生產(chǎn)，其含量測定方法尚未見公開報道。本文探索用HPLC法進行分離測定，在氰基柱上以醋酸氟氫松為內(nèi)標(biāo)，考察了樣品中各組分的線性關(guān)系，并進行了回收率試驗及樣品含量測定，結(jié)果表明，本法簡便迅速，結(jié)果準確。

　　1、儀器與試藥

　　1.1 儀器Waters510輸液泵，Waters490紫外檢測器，Rheodyne7125定量進樣閥，Waters740色譜數(shù)據(jù)處理機。

　　1.2 樣品與試劑對照品倍他米松、馬來酸氯苯那敏符合中國藥典1995年版的規(guī)定，在本文色譜條件下無雜質(zhì)峰出現(xiàn)，賦形劑和樣品由香港麒麟藥廠提供，醋酸氟氫松為化學(xué)原料，含量為99.9％，乙腈（色譜純），甲醇、三乙胺和磷酸均為分析純，水為重蒸水。

　　2、色譜條件與色譜參數(shù)

　　2.1 色譜條件色譜柱：SpherisorbCN（10μm，4.6mm×250mm），大連化物所；流動相：水—甲醇—乙腈—三乙胺（80∶20∶20∶1.4，用磷酸調(diào)整pH為7.5）；流速：1.5mL/min；檢測波長：254nm；靈敏度：0.5AUFS；柱溫：30℃；進樣量：20μL。

　　3、方法與結(jié)果

　　3.1 內(nèi)標(biāo)溶液的制備稱取醋酸氟氫松適量，加甲醇溶解并制成1g/L的溶液，備用。

　　3.2 線性關(guān)系精密稱取馬來酸氯苯那敏對照品400mg及倍他米松對照品50mg，置100mL容量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密取上述溶液1、2、3、5、7、9、10mL，分別置100mL量瓶中，各精密加入內(nèi)標(biāo)溶液5mL，用流動相稀釋至刻度，搖勻。照上述色譜條件進樣20μL，以組分與內(nèi)標(biāo)物的峰面積之比為縱坐標(biāo)，以各組分的濃度（mg/L）為橫坐標(biāo)，求出馬來酸氯苯那敏及倍他米松的線性回歸方程分別為：Y＝9.002×10-3X-7.6×10-3

　　r＝1.0000Y＝2.540×10-2X-2.3×10-3

　　r＝1.0000

　　結(jié)果表明，馬來酸氯苯那敏濃度在40.2～402.0mg/L、倍他米松濃度在5.17～51.70mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

　 3.3 精密度試驗在上述色譜條件下取樣品溶液重復(fù)進樣，測定樣品峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積比值，計算各組分的RSD。馬來酸氯苯那敏RSD＝0.8％（n=8）；倍他米松RSD＝0.6％（n=8），結(jié)果表明：本法精確度較好。

　　3.4 回收率實驗精密稱取馬來酸氯苯那敏對照品約20mg，置100mL量瓶中，按處方加入各種輔料；另精密稱取倍他米松對照品約25mg，置50mL量瓶中，加流動相超聲處理使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密取此溶液5mL，加至上述100mL量瓶中，再精密加入內(nèi)標(biāo)溶液5mL，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過。取續(xù)濾液按上述色譜條件進樣測定。結(jié)果馬來酸氯苯那敏、倍他米松回收率分別為99.2％、100.9％，RSD分別為0.7％、0.6％，n=7。

　　3.5 樣品測定精密稱取本品的細粉適量（約10片量），置100mL量瓶中，加流動相超聲處理使溶解，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液5mL，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過。取續(xù)濾液按上述色譜條件進樣測定。

　　4、討論

　　實驗中曾比較了兩種色譜填料對分離測定的影響，一種為島津CLC—CN（10μm，5mm×150mm），另

　　一種為中科院大連化物所SpherisorbCN（10μm，4.6mm×250mm），前者的各組分容量因子明顯大于后者，若使用島津氰基柱需調(diào)整流動相中有機相的比例，流動相為水—甲醇—乙腈—三乙胺（56∶24∶20∶0.4，pH=7.5）。本文實驗中采用的三元流動相，也比較過用各種比例的水—甲醇或水—乙腈為流動相，但對于本文所含組分分離效果始終不理想，主要是氯苯那敏的容量因子沒有合適的值。