摘要：目的：建立咪唑斯汀片的含量測(cè)定方法方法：采用反相高效液相色譜法，色譜柱為C18，檢測(cè)波長(zhǎng)為285nm，流動(dòng)相為0.025mol／L磷酸二氫鉀緩沖液-乙腈（72：28），流速為0.5ml／min、結(jié)果：咪唑斯汀檢測(cè)濃度在4.16～416μg／ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9998），平均加樣回收率為99.98%（RSD=0.44%，n=3）。結(jié)論：本法可用于咪唑斯汀片的含量測(cè)定，且操作簡(jiǎn)便、結(jié)果準(zhǔn)確。
　　
　　關(guān)鍵詞：反相高效液相色譜法；咪唑斯汀片；含量測(cè)定
　　
　　咪唑斯汀主要用于治療成人或12a以上兒童的季節(jié)性或常年性過(guò)敏性鼻炎及蕁麻疹等過(guò)敏性癥狀，具有獨(dú)特的抗組胺及其它炎癥介質(zhì)的作用，為強(qiáng)效和高度選擇性的H1受體拮抗劑，且在抗組胺用藥劑量下沒(méi)有抗膽堿、鎮(zhèn)靜以及血管方面的副作用，因此，較其它抗組胺類藥物具有更大的優(yōu)勢(shì)。其化學(xué)名稱為2-[[[1-[（4-氟苯基）甲基]-1氫-苯并咪唑-2-基]-4-哌啶基]甲基-氨基]-4（3氫）-嘧啶酮。目前，其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)在國(guó)內(nèi)、外藥典中均未收載，國(guó)內(nèi)也尚未見(jiàn)有以高效液相色譜（HPLC）法測(cè)定該藥含量的報(bào)道，故筆者根據(jù)國(guó)外有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，建立了其片劑的含量測(cè)定方法。
　　
　　l儀器與試藥
　　
　　1.1儀器
　　
　　LC900高效液相色譜系統(tǒng)，包括PU一980型智能泵UV-975型紫外檢測(cè)器、100%5手動(dòng)進(jìn)樣閾（日本Jasco公司）；L-200SM十萬(wàn)分之一光電天平（日本Jasco公司）；TDx高速離心機(jī)（美國(guó)雅培公司）；pHS-3C型pH儀（上海雷磁儀器廠）。
　　
　　1.2試藥
　　
　　咪唑斯汀對(duì)照品（北京萬(wàn)全德眾有限公司，批號(hào)：03021011，純度：99.95%）；咪唑斯汀片（法國(guó)圣德拉堡公司，批號(hào)：030818587、030818687、031129994）；乙腈、乙醚、甲醇均為色譜純；磷酸二氫鉀、磷酸為分析純。
　　
　　2方法與結(jié)果
　　
　　2.1色譜條件
　　
　　色譜柱：HiQsilCl8（150mm×4.6mm，5μm）；流動(dòng)相：0.025mol／L磷酸二氫鉀緩沖液-乙腈（72：28），磷酸調(diào)pH至2.58，并經(jīng)0.22μm微孔濾膜濾過(guò)后使用；檢測(cè)波長(zhǎng)：285nm；柱溫：室溫；流速：0.5ml／min；進(jìn)樣量：2μl。
　　
　　2.2溶液的制備
　　
　　2.2.1對(duì)照品溶液的制備：準(zhǔn)確稱取咪唑斯汀對(duì)照品10mg，置于100ml容量瓶中，加甲醇適量溶解并稀釋至刻度，即得。
　　
　　2.2.2樣品溶液的制備：取本品20片（批號(hào)：030818687），準(zhǔn)確稱定，研細(xì)。再準(zhǔn)確稱取適量（約相當(dāng)于咪唑斯汀10mg），置于100ml容量瓶中，加甲醇適量溶解并稀釋至刻度，即得。
　　
　　2.3方法專屬性考察
　　
　　對(duì)咪唑斯汀、溶劑及輔料進(jìn)行HPLC分離檢測(cè)。采用反相高效液相色譜（RP-HPLC）法測(cè)定咪唑斯汀含量的方法專屬性好。
　　
　　2.4線性關(guān)系考察
　　
　　采用加重法準(zhǔn)確稱取咪唑斯汀對(duì)照品適量（0.00416g），置于10ml容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為416μg／ml咪唑斯汀標(biāo)準(zhǔn)貯備液。精密吸取上述溶液各0.1、0.5、1.0、2.5、5.0、7.5、10.0ml，分別置于1Oml容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。按“2.1”項(xiàng)下色譜條件，分別進(jìn)樣20μl，記錄峰面積。結(jié)果表明，咪唑斯汀保留時(shí)間為13.4min，理論塔板數(shù)為2392，均符合《中國(guó)藥典》2000年版的規(guī)定，以峰面積積分值（Y）為縱坐標(biāo)，咪唑斯汀濃度（X）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為Y=8.2343×10000X-9.2599×1000（r=0.9998）表明咪唑斯汀對(duì)照品溶液檢測(cè)濃發(fā)4.16-416μg／ml范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系。
　　
　　2.5最低檢測(cè)限
　　
　　按“2.1”項(xiàng)下色譜條件，以信噪比為3作指標(biāo)，測(cè)定最低檢測(cè)限。結(jié)果表明，濃度為13.87ng／ml的咪唑斯汀對(duì)照品溶液進(jìn)樣20μl，其信號(hào)約為噪占的3倍，即最低檢測(cè)限為0.2100%ng。
　　
　　2.6精密度試驗(yàn)
　　
　　精密吸取“2.2.2”項(xiàng)下溶液20μl，按一2.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣5次，結(jié)果樣品含量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)為0.56%（n=5）。
　　
　　2.7重現(xiàn)性試驗(yàn)
　　
　　收同一批樣品（批號(hào)：030818687.約相當(dāng)咪唑斯汀5mg）6份，準(zhǔn)確稱定，并按“2.10”項(xiàng)下方法測(cè)定瞇唑斯汀的含量。結(jié)果樣品含量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差為0.68%，表明本法現(xiàn)性較好
　　
　　2.8穩(wěn)定性試驗(yàn)
　　
　　取“2.2.2”項(xiàng)下溶液，于室溫下放置0、2、4、6、12、24、48h，分別按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，峰面積值基本不變，其積分值的卡甘列標(biāo)準(zhǔn)差為1.22%，表明樣品在48h內(nèi)可保持穩(wěn)定。
　　
　　2.9加樣回收率試驗(yàn)
　　
　　稱取已知含量的樣品適量（批：030818687，約相當(dāng)于咪唑斯汀5mg）共9份，準(zhǔn)確稱定，置于1O0ml容量瓶中，分別加入咪唑斯汀對(duì)照品4、5、6mg（各3份）。用甲醇溶解并稀釋至客刻度，搖勻后按“2.10”項(xiàng)下方法分別測(cè)定含量，并計(jì)算回收率。
　　
　　2.10樣品含量測(cè)定
　　
　　分別取3批咪唑斯汀片（各3份）。按“2.2.2”項(xiàng)方法制備樣品溶液，并按“2.1”項(xiàng)色譜條件各進(jìn)樣20μl，記錄峰面積，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算樣品中咪唑斯汀的含量。
　　
　　3討論
　　
　　筆者曾號(hào)察流動(dòng)卡upH值分別為2.5、2.58、3.2時(shí)對(duì)色譜行為的影響.結(jié)果發(fā)現(xiàn)當(dāng)pH值為2.5時(shí)，主峰保留時(shí)間縮短，似鄰雜質(zhì)峰對(duì)主峰影響較大；當(dāng)pH值為3.2時(shí)，主峰保留時(shí)間延長(zhǎng)但峰形不好；而選擇pH值為2.58（±0.02）時(shí)，保留時(shí)間和峰形較為適宜。
　　
　　筆者曾配制乙腈比例分別為35%、28%、20%的流動(dòng)相以號(hào)察乙腈比例對(duì)色譜峰的影響。結(jié)果表明，流動(dòng)相中乙腈比例時(shí)，峰及栩鄰雜質(zhì)峰的保留時(shí)間影響較大；當(dāng)乙腈比例為35%時(shí)，主峰保留時(shí)間縮短且相鄰雜質(zhì)峰對(duì)主峰影響較大；當(dāng)乙腈比例為20%時(shí)，木出現(xiàn)主峰；而采用乙腈比例為28%的流動(dòng)相則較為適宜。
　　
　　按紫外分光光度法在200nm～400nm波長(zhǎng)范圍對(duì)咪唑斯汀進(jìn)行掃描.結(jié)果表明，其在288nm處有最大吸收。但筆者最終選擇285nm為測(cè)定波長(zhǎng).是因其在此波長(zhǎng)處?kù)`敏度較好，不僅如此，測(cè)定時(shí)其基線噪聲低且穩(wěn)定。
　　
　　由于不清楚詳細(xì)的處方及有關(guān)輔料，故本試驗(yàn)沒(méi)有沒(méi)空白試驗(yàn)，回收率試驗(yàn)則采用加樣回收的方法。