
您的位置:首頁 > 技術(shù)文獻 > 行業(yè)標(biāo)準 > 氣相色譜儀氣路系統(tǒng),是一個載氣連續(xù)運行、管路密閉的系統(tǒng)。氣路系統(tǒng)的氣密性,載氣流速的穩(wěn)定性,以及流量測量的準確性都對色譜實驗結(jié)果有影響,需要注意控制。常用的載氣有:氫氣、氮氣、氦氣、氬氣和空氣。
1、色譜柱長時間不用,存放時,柱內(nèi)應(yīng)充滿溶劑,兩端封死(如ACN適于反相色譜柱,正相色譜柱用相應(yīng)的有機相)
2、對于手動進樣器,當(dāng)使用緩沖溶液時,要用水沖洗進樣口,同時搬動進樣閥數(shù)次,每次數(shù)毫升。
3、流動相使用前必須過濾,不要使用多日存放的蒸餾水(易長菌)。
維護知識問答
1、為什么溶劑和樣品要過濾?
溶劑和樣品過濾非常重要,它會對色譜柱、儀器起到保護作用,消除由于污染對分析結(jié)果的影響。)
色譜柱:由于填料顆粒很細,色譜柱內(nèi)腔很小,溶劑和樣品中的細小顆粒會使色譜柱和毛細管容易堵塞。
儀器:溶劑和樣品中的細小顆粒會增加進樣閥的堵塞和磨損,同時也會增加泵頭內(nèi)的藍寶石活塞桿和活塞的磨損。
2、HPLC用緩沖鹽時,由于泵頭內(nèi)的緩沖鹽溶液存在高壓析鹽現(xiàn)象,析出的細小鹽粒非常堅硬,它附著在藍寶石活塞桿上,隨著藍寶石活塞桿的往復(fù)運動,容易產(chǎn)生劃痕,并磨損密封墊,造成漏液等故障現(xiàn)象。
3、流動相使用前為什么要脫氣?
流動相使用前必須進行脫氣處理,以除去其中溶解的氣體(如O2),以防止在洗脫過程中當(dāng)流動相由色譜柱流至檢測器時,因壓力降低而產(chǎn)生氣泡。氣泡會增加基線的噪音,造成靈敏度下降,甚至無法分析。溶解的氧氣還會導(dǎo)致樣品中某些組份被氧化,柱中固定相發(fā)生降解而改變柱的分離性能。
4、常用的脫氣方法比較:
氦氣脫氣法:利用液體中氦氣的溶解度比空氣低,連續(xù)吹氦脫氣,效果較好,但成本高。
加熱回流法:效果較好,但操作復(fù)雜,且有毒性揮發(fā)污染。
抽真空脫氣法:易抽走有機相。
超聲脫氣法:流動相放在超聲波容器中,用超聲波振蕩10-15min,此法效果最差
5、如何防止溶劑瓶內(nèi)溶劑過濾器的堵塞,以及堵塞后的處理?
溶劑的質(zhì)量或污染以及藻類的生長會堵塞溶劑過濾器,從而影響泵的運行,尤其水溶液或磷酸鹽緩沖液(PH=4—7)。以下幾種方法可以有效防止溶劑瓶內(nèi)溶劑過濾器的堵塞。
A:請嚴格執(zhí)行溶劑過濾。
B:請勿使用多日存放的蒸餾水及磷酸鹽緩沖液!
C:如果應(yīng)用許可,可在溶劑中加入0.0001---0.001M的疊氮化鈉.
D:在溶劑瓶內(nèi)溶劑的上方小流量連續(xù)吹氬氣,以隔絕空氣。
E:避免使溶劑瓶暴露在直射陽光下,盡量使用琥珀色的溶劑瓶盛放水溶液或磷酸鹽緩沖液。堵塞后的處理法方法:將過濾頭從組件中取下,在濃硝酸(35%)中浸泡1h,然后用二次蒸餾水沖洗干凈并超聲處理。
6、泵如何維護?
泵給色譜柱提供穩(wěn)定、無脈動、流量準確的流動相,及時合理的維護非常重要。A:流動相使用前請必須脫氣、過濾。
B:使用緩沖鹽時,關(guān)機前,用100%的水沖洗系統(tǒng)20分鐘,然后用有機溶劑沖洗系統(tǒng)10分鐘(如甲醇),然后關(guān)泵,(適于反相色譜柱)。[正相色譜柱用適當(dāng)?shù)娜軇_洗]
7、手動進樣閥需做那些維護,使用時要注意什么?
對于手動進樣器,當(dāng)使用緩沖溶液后,或者進濃度差異比較大的樣品時要用專用工具而不是用帶針頭的注射器沖洗進樣口,同時搬動進樣閥數(shù)次,每次數(shù)毫升。
注意事項:)
●安裝時六通閥的5,6出口要與注射器在同一水平線上,以防止虹吸現(xiàn)象的發(fā)生,導(dǎo)致進樣量的重復(fù)性變異。
●進樣量的多少要根據(jù)定量管的LOOP體積決定。
當(dāng)樣品量少時:進樣體積由注射器的進樣體積決定,但最大進樣體積要小于1/2loop體積。
當(dāng)樣品量較多時:進樣體積由定量管的體積決定,為保證樣品完全把定量管的流動相置換干凈,需注射5—6倍的LOOP體積。
●要使用專用的液相注射器進樣,絕對不可以用氣相的注射器。
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