【摘要】目的］用高效液相色譜法測定十三味馬錢子丸士的寧的含量。［方法］采用HyperCloneBDSC18柱（250×4.6mm，5um）；流動相為乙腈��0.01mol/L庚烷磺酸鈉與0.02mol/L磷酸二氫鉀等量混合溶液（用10%磷酸調(diào)節(jié)pH值為2.8）（21:79）；流速1.0ml/min；檢測波長260nm；柱溫30℃。［結(jié)果］士的寧濃度的線性范圍為7.382～366.4μg/ml，r=0.9996，回收率為98.74%（RSD=0.6%）。［結(jié)論］本法方便、快速、準確，可用于十三味馬錢子丸的質(zhì)量控制。
　　
　　【關鍵詞】十三味馬錢子丸；士的寧；高效液相色譜法；含量測定
　　
　　Abstract：［Objective］Tomeasurethestrychnincontentin13vomic�瞡utswithHPLC.［Method］TakethemixedsolutionofHyperCloneBDSC18column（250×4.6mm，5um）,flowphase：acetonitrile-0.01mol/Lheptanesodiumsulfonateandequal0.02mol/Lpatossiumdihydrogenphosphate（with10%phosphoricacidforadjustment,pHbeing2.8）（21:79）；theflowspeed:1.0ml/min；measuredwavelength：260nm；columntemperature：30℃.［Result］Thestrychninconcentrationisinthelinearrangeof7.382～366.4μg/ml，r=0.9996，thereclaimrateis98.74%（RSD=0.6%）.［Conclusion］Themethodiseasy,quickandcorrect,canbeusedforqualitycontrolof13vomic�瞡utsstrychnin.
　　
　　Keywords：13vomic�瞡uts;strychnine;HPLC;contentmeasurement
　　
　　十三味馬錢子丸具有行氣，降血壓，化瘀止痛的功效，用于治療氣血上壅的高血壓，胸背疼痛，呼吸困難，頭暈，耳鳴，牙齦紅腫，“岡巴”病亢盛等。士的寧為馬錢子中的主要毒性成分，應對其含量進行控制，原標準［1］無控制指標。為了更好的控制該藥的質(zhì)量，本文用HPLC法測定樣品中士的寧的含量。
　　
　　1儀器與試藥
　　
　　Agilent1200型高效液相色譜儀；乙腈為色譜純；其它試劑均為分析純。士的寧對照品購自中國藥品生物制品檢定所，批號705-9004，供含量測定用。十三味馬錢子丸為市售，產(chǎn)地西藏（批號080814，081101，081212）。
　　
　　2方法與結(jié)果
　　
　　2.1色譜條件［2］色譜柱：HyperCloneBDSC18（250×4.6mm，5um）；流動相：乙腈��0.01mol/L庚烷磺酸鈉與0.02mol/L磷酸二氫鉀等量混合溶液（用10%磷酸調(diào)節(jié)pH值為2.8）（21:79）［2］；流速1.0ml/min；檢測波長260nm；柱溫30℃。此條件下士的寧與其它組分能達到基線分離，且陰性對照試驗無干擾，見圖1。
　　
　　A對照品B十三味馬錢子丸C陰性對照
　　
　　圖1十三味馬錢子丸高效液相色譜圖（略）
　　
　　2.2對照品溶液制備精密稱取士的寧對照品18.32mg，置于50ml量瓶中，加三氯甲烷使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液。
　　
　　2.3供試品溶液的制備取供試品（平均丸重為0.4103g）剪碎，取約0.4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加氫氧化鈉試液2ml，混勻，放置30min，精密加入三氯甲烷20ml，密塞，稱定重量，置水浴中加熱加流2h，放冷，再稱定重量，用三氯甲烷補足減失的重量，搖勻，通過鋪有無水硫酸鈉的濾紙濾過，精密量取續(xù)濾液10ml，置分液漏斗中，用1%硫酸溶液振搖提取5次，合并酸液，用30%氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值為10～11，用三氯甲烷振搖提取5次（10、10、5、5、5ml），合并三氯甲烷液，蒸干，殘渣加甲醇溶解并稀釋至10.0ml，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
　　
　　2.4陰性樣品液的制備取處方中除馬錢子粉外的其他藥味，按十三味馬錢子丸制備方法制成陰性樣品，取約0.4g，按2.3制備方法同法制備。
　　
　　2.5線性關系的考察分別精密量取對照品貯備液0.2、1.0、2.0、4.0、8.0、10.0ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，在上述色譜條件，進樣5ul，測定峰面積，以峰面積積分值為縱坐標，士的寧的濃度為橫坐標，繪制標準曲線，得回歸方程：Y=2.68X 11.029，r=0.9996，表明士的寧的濃度在7.328～366.4μg/ml范圍內(nèi)具有良好線性關系。
　　
　　2.6重復性試驗精密稱取同一批號（080814）的十三味馬錢子丸樣品6份，分別按供試溶液制備方法制成供試品溶液，測定其士的寧的含量，其RSD為1.97%，說明此方法重復性良好。
　　
　　2.7穩(wěn)定性試驗精密吸取供試品溶液，按上述色譜條件分別于0、2、4、8、16、32、48h分別進樣5ul，測得其平均峰面積值的RSD為1.56%，表明供試品溶液中的士的寧在48h小時內(nèi)是穩(wěn)定的。
　　
　　2.8回收率試驗精密稱取已知含量（含士的寧0.9166mg/丸）的十三味馬錢子丸，精密添加不同量的士的寧對照品，按供試溶液制備方法及上述色譜條件分別進5ul,記錄色譜圖，計算回收率為98.74%，RSD=0.6%，結(jié)果表明本法回收率好，方法可行。
　　
　　2.9樣品測定分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl,按上述色譜條件測定，記錄色譜圖，按外標法計算3批樣品中士的寧的含量，結(jié)果見表1。
　　
　　表1樣品測定表（略）
　　
　　3討論
　　
　　本文用HPLC法測定樣品中士的寧的含量，線性關系的測定、回收試驗、溶液穩(wěn)定性試驗和重復性試驗等實驗結(jié)果顯示，方法的重現(xiàn)性好，測定結(jié)果準確。