摘要：目的建立一種用氣相色譜法同時(shí)測(cè)定止癢搽劑中樟腦、薄荷腦、冰片三組分含量的方法。方法采用聚乙二醇（PEG）-20M填充柱（涂布濃度為10%）；柱溫155℃；進(jìn)樣口溫度為190℃；FID檢測(cè)器，檢測(cè)器溫度250℃。結(jié)果樟腦在0.198～1.191mg/ml范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系（r=0.99999），薄荷腦在0.132～0.790mg/ml范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系（r=0.99999），冰片在0.139～0.833mg/ml范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系（r=0.9999）；平均加樣回收率分別為：樟腦95.21%，RSD為1.58%（n=9），薄荷腦102.71%，RSD為1.29%（n=9），冰片99.33%，RSD為1.40%（n=9）。結(jié)論該法簡(jiǎn)便快速，結(jié)果準(zhǔn)確，可以有效地控制該藥品的質(zhì)量。
　　
　　關(guān)鍵詞：氣相色譜法；止癢搽劑；樟腦；薄荷腦；冰片
　　
　　SimultaneousDeterminationofThreeComponentsinAntipruriticLinimentbyGC
　　
　　Abstract:ObjectiveToestabilshamethodforsimultaneousdeterminationofcamphor,menthol,andborneolinantipruriticlinimentbyGC.MethodsUsing10%PEG-20Mpackedcolumn.Thecolumntemperaturewasat155℃.Injectortemperaturewasat190℃.FIDdetectorwithtemperatureat250℃.ResultsCamphorshowedagoodlinearrelationshipatarangeof0.198～1.191mg/ml（r=0.99999），mentholshowedagoodlinearrelationshipatarangeof0.132～0.790mg/ml（r=0.99999），borneolshowedagoodlinearrelationshipatarangeof0.139～0.833mg/ml（r=0.9999）；theaveragerecoveryandtherelativestandarddeviation：Camphor95.21%,RSD1.58%（n=9），Menthol102.71%,RSD1.29%（n=9）,Borneol99.33%，RSD1.40%（n=9）.ConclusionThemethodisconvenient,rapidandaccurate,andcanbeusedforthequalitycontrolofthedrug.
　　
　　Keywords:GC；AntipruriticLiniment；Camphor；Menthol；Borneol
　　
　　痱子屬皮膚濕疹，為夏季常見(jiàn)皮膚病之一，盡管有其自限性，但發(fā)作時(shí)瘙癢難耐，皮膚滲透性差，影響患者的學(xué)習(xí)、工作和休息。針對(duì)痱子的生理特點(diǎn)，我們研制了止癢搽劑。臨床應(yīng)用證明，止癢搽劑質(zhì)量穩(wěn)定，療效可靠，極大地減輕了患者的痛苦。在制定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，我們查閱了有關(guān)文獻(xiàn)［1~4］，并根據(jù)制劑特點(diǎn)及實(shí)驗(yàn)室條件，建立了一種用氣相色譜法同時(shí)測(cè)定止癢搽劑中樟腦、薄荷腦、冰片三組分含量的方法。該法簡(jiǎn)便快速，結(jié)果準(zhǔn)確，可以有效地控制該藥品的質(zhì)量。
　　
　　1儀器與試藥
　　
　　Agilent6820氣相色譜儀及色譜工作站；瑞士METTLERAE-240（0.01mg）電子天平；樟腦對(duì)照品（批號(hào)110747-200107，供含量測(cè)定用,中國(guó)藥品生物制品檢定所）；薄荷腦對(duì)照品（批號(hào)110728-200506，供含量測(cè)定用,中國(guó)藥品生物制品檢定所）；冰片對(duì)照品（批號(hào)110742-200516，供含量測(cè)定用,中國(guó)藥品生物制品檢定所）；萘（批號(hào)111673-200401，GC內(nèi)標(biāo)物，中國(guó)藥品生物制品檢定所）；止癢搽劑（批號(hào)060425，060427，060429，銅陵市人民醫(yī)院制劑中心）；無(wú)水乙醇為分析純。
　　
　　2方法與結(jié)果
　　
　　2.1色譜條件色譜柱聚乙二醇（PEG）-20M填充柱（涂布濃度為10%）；柱溫155℃；進(jìn)樣口溫度190℃；FID檢測(cè)器，檢測(cè)器溫度250℃；進(jìn)樣量2μl。在上述色譜條件下，樟腦、薄荷腦、龍腦、異龍腦與內(nèi)標(biāo)物峰之間的分離度均大于1.5，理論板數(shù)按樟腦峰計(jì)算大于2500，滿足試驗(yàn)要求（見(jiàn)圖1a）。
　　
　　2.2溶液的制備及線性關(guān)系的考察
　　
　　2.2.1內(nèi)標(biāo)溶液的制備精密稱取萘適量，加無(wú)水乙醇溶解，并稀釋制成每毫升中約含4mg的溶液，搖勻，即得內(nèi)標(biāo)溶液。
　　
　　2.2.2對(duì)照品溶液的制備精密稱取適量樟腦對(duì)照品、薄荷腦對(duì)照品、冰片對(duì)照品于同一棕色量瓶中，加無(wú)水乙醇溶解，并稀釋制成每毫升中約含樟腦2mg，薄荷腦1.3mg，冰片1.3mg的溶液，即得對(duì)照品混合貯備液。
　　
　　2.2.3供試品溶液的制備精取樣品2ml，置25ml棕色量瓶中，加無(wú)水乙醇至刻度，搖勻，得樣品備用液；精密吸取樣品備用液1ml于10ml棕色量瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml，加無(wú)水乙醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液。
　　
　　2.2.4空白實(shí)驗(yàn)按處方組成比例，取除三組分外的其它成分制成空白樣品，按供試品溶液制備方法制備陰性對(duì)照溶液。在上述色譜條件下，分別吸取供試品溶液、對(duì)照品溶液、陰性對(duì)照溶液各2μl，注入氣相色譜儀測(cè)定，記錄色譜圖，在與三組分峰保留時(shí)間相同處，無(wú)色譜峰出現(xiàn)。表明其它組分對(duì)三組分的測(cè)定無(wú)干擾，符合測(cè)定要求（見(jiàn)圖1c）。
　　
　　圖1GC色譜圖（略）
　　
　　2.2.5標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密吸取對(duì)照品貯備液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0ml，分別置10ml棕色量瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液1ml，用無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻，照上述色譜條件測(cè)定，記錄色譜圖，分別以各自對(duì)照品峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程為：樟腦A=-0.0016C 0.9736，r=0.99999，線性范圍為0.198～1.191mg/ml；薄荷腦A=0.00335C 0.9692，r=0.99999，線性范圍為0.132～0.790mg/ml；冰片A=0.00346C 0.9541，r=0.9999，線性范圍為0.139～0.833mg/ml。
　　
　　2.3精密度實(shí)驗(yàn)精密吸取標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的同一份對(duì)照品溶液重復(fù)進(jìn)樣5次，以3組分對(duì)照品峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值計(jì)算，RSD分別為：樟腦1.21%，薄荷腦1.26%，冰片0.97%。
　　
　　2.4重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取同批樣品5份，按供試品溶液制備方法處理，在上述色譜條件下測(cè)定，結(jié)果平均含量分別為：樟腦47.29mg/ml，RSD為1.13%（n=5）；薄荷腦45.86mg/ml，RSD為1.61%（n=5）；冰片16.77mg/ml，RSD為0.92%（n=5）。
　　
　　2.5穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取制備好的供試品溶液，按上述色譜條件，每間隔2h測(cè)定1次，RSD為1.37%（n＝6），結(jié)果表明樣品溶液在12h內(nèi)比較穩(wěn)定。
　　
　　2.6加樣回收率實(shí)驗(yàn)取已知標(biāo)示量的樣品適量于10ml棕色量瓶中，分別加入相當(dāng)于樣品量的80%，100%，120%的樟腦對(duì)照品、薄荷腦對(duì)照品、冰片對(duì)照品溶液及1ml內(nèi)標(biāo)液，按供試品溶液制備方法處理，在上述色譜條件下測(cè)定，記錄各自的峰面積并計(jì)算。平均回收率分別為：樟腦95.21%，RSD為1.58%（n=9）；薄荷腦102.71%，RSD為1.29%（n=9）；冰片99.33%，RSD為1.40%（n=9）。結(jié)果見(jiàn)表1。
　　
　　2.7樣品的含量測(cè)定取不同批號(hào)的3批樣品（060425，060427，060429），在上述測(cè)定條件下測(cè)定，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算樣品中樟腦、薄荷腦、冰片的含量。結(jié)果見(jiàn)表2。
　　
　　表1回收率實(shí)驗(yàn)（略）
　　
　　表2樣品中樟腦、薄荷腦、冰片含量測(cè)定結(jié)果（略）
　　
　　3討論
　　
　　3.1止癢搽劑為有一定乙醇含量的醇制劑，在本文所建立的測(cè)定方法下，樣品無(wú)須任何處理，直接用無(wú)水乙醇稀釋至一定濃度即可。與文獻(xiàn)方法［5~7］相比，此方法更簡(jiǎn)便快速，且分離度好，回收率高，可作為止癢搽劑及相關(guān)制劑的質(zhì)量控制方法。
　　
　　3.2由于止癢搽劑中有成分易受空氣及紫外線的氧化而顏色變深，所以實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)使用棕色瓶，并注意避光操作，以免影響含量測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度。
　　
　　3.3內(nèi)標(biāo)物篩選中，曾對(duì)水楊酸甲酯、聯(lián)苯、正十四烷、萘等進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果以萘為內(nèi)標(biāo)較為理想，且陰性對(duì)照無(wú)干擾。
　　
　　3.4在所建立的色譜條件下，冰片中的龍腦和異龍腦成分能完全分離，冰片的含量以龍腦和異龍腦峰面積之和計(jì)算。