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正常精液是一種混合物，在射精時由睪丸和附睪的分泌物及懸浮其中的精子與前列腺、精囊腺和尿道球腺的分泌物混合而成，最終射出的混合物是一種粘稠的液體。精子分析的方法有很多，其中可通過培養(yǎng)進(jìn)行檢測。
Leagene精子細(xì)胞BWW培養(yǎng)基儲存液主要由氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、硫酸鎂、酚紅等組成，不含葡萄糖、丙酮酸鈉、BSA等以及抗生素，是一種旨在用于廣譜動物和人體精子細(xì)胞獲能處理的常用營養(yǎng)液。
操作步驟
1、 取干凈的精液樣本室溫放置，使之充分液化。 2、 制備精子細(xì)胞（僅供參考，不是必須步驟）：
1）、上泳法：取一個無菌的15ml錐底離心管，加入1ml液化的精液，在其上方輕輕加入Earle培養(yǎng)液，45°傾斜試管。輕輕豎立試管，取出最上層的1ml液體。加入8ml增補的Earle培養(yǎng)液稀釋，棄上清。加入Earle培養(yǎng)液0.5ml重新懸浮細(xì)胞，用于精子密度或功能的評估。
2）、非連續(xù)密度梯度法：取一個無菌的錐底離心管，加入Percoll。輕輕加入3ml 40%的Percoll于Percoll液面上，小心操作，不要打亂兩種液體的界面。輕輕加入1-2ml精液于梯度溶液上，棄上清。將管底的精子團重新懸浮于的Earle培養(yǎng)液中，離心，棄上清。加入1mlEarle培養(yǎng)液，重新懸浮。
3、 將含有精子細(xì)胞的離心管置于37℃含5%CO2、95%空氣的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育。如無上述培養(yǎng)箱，可將離心管密封加蓋，置于37℃的普通培養(yǎng)箱內(nèi)孵育。在孵育過程中，大多數(shù)活動的精子從精漿中游離到覆蓋上面的培養(yǎng)液內(nèi)。
4、 離心精子懸液，使精子細(xì)胞密度接近于10×106/ml，將精子重懸于精子細(xì)胞BWW培養(yǎng)基中，并在37℃含5%CO2、95%空氣的細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育。如無上述培養(yǎng)箱，可將離心管密封加蓋，置于37℃的普通培養(yǎng)箱內(nèi)孵育。在孵育過程中，將試管20°傾斜。
注意事項:
1、 注意無菌操作，盡量避免污染。
2、 如無Earle培養(yǎng)液和增補的Earle培養(yǎng)液，可用精子細(xì)胞BWW培養(yǎng)基代替。
3、 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
