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發(fā)布時間:2017/12/15 來源: 上海徠創(chuàng)生物科技有限公司 閱讀次數(shù):400
慢病毒具有廣泛的感染譜,可以有效感染分裂期和靜止期的細胞,并且能夠長期穩(wěn)定表達外源基因,因而成為導入外源基因的有力工具,F(xiàn)在慢病毒系統(tǒng)已經(jīng)被廣泛應用到各種細胞系的基因過表達、基因干擾以及活體動物實驗中。
服務內(nèi)容:慢病毒包裝的基因涉及常規(guī)的蛋白編碼基因及非編碼基因,比如:miRNA、lncRNA以及circularRNA等的過表達及干擾的慢病毒包裝服務。
服務編號 | 病毒滴度 | 規(guī)格 | 贈送陰性對照 | 價格 | 周期 |
LC1033 | 過表達慢病毒 | 過表達慢病毒,病毒滴度>10^8PFU/ml | 1ml(>10^8PFU/ml) | 詢價 | 6-8周 |
LC1034 | 干擾慢病毒 | 過表達慢病毒,病毒滴度>10^8PFU/ml | 1ml(>10^8PFU/ml) | 詢價 | 6-8周 |
慢病毒包裝服務價格與周期
慢病毒包裝服務實驗流程
a. 慢病毒過表達質(zhì)粒載體的構建: 根據(jù)目的基因序列設計特異性擴增引物,采用高保真PCR技術從模板中調(diào)取目的基因CDS區(qū)連入核心載體。
b. 慢病毒干擾質(zhì)粒載體的構建:合成目的基因的siRNA序列,退火成雙鏈,然后連入慢病毒干擾質(zhì)粒載體。
c. 非編碼基因過載體構建:從模板中調(diào)取基因相應的miRNA前體, 然后連入慢病毒核心質(zhì)粒(miRNA以基因組為模板,lncRNA和circularRNA根據(jù)需要可以用cDNA或基因組為模板)。
d. 慢病毒載體的包裝與濃縮純化: 核心質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒進行高純度無內(nèi)毒素抽提,共轉(zhuǎn)染293T細胞,轉(zhuǎn)染后8h 更換為完全培養(yǎng)基,培養(yǎng)48和72h后,分別收集富含慢病毒顆粒的細胞上清,病毒上清液通過超離心濃縮病毒。
服務流程:
徠創(chuàng)客戶須知
1、適用于在難以轉(zhuǎn)染的細胞中進行的基因過表達或干擾研究,如原代神經(jīng)細胞,干細胞,腫瘤細胞等;
2、適用于快速建立穩(wěn)定表達的特定基因細胞株;
3、適用于In vivo 實驗,包括穩(wěn)定表達細胞株成瘤實驗、局部注射、活體動物的基因過表達或干擾等。
徠創(chuàng)生物服務承諾
提供完整客觀準確的實驗報告。
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