洗刷在
ELISA試劑盒進(jìn)程中雖不是一個反響步驟，但卻也決議著試驗的勝敗。ELSIA就是靠
洗刷來到達(dá)分離游離的和結(jié)合的酶符號物的意圖。通過洗刷以鏟除殘留在板孔中沒能與固
相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反響進(jìn)程中非特異性地吸附于固相載體的攪擾物質(zhì)。聚
苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，而在洗刷時又應(yīng)把這種非特異性吸附的攪擾物
質(zhì)洗刷下來。可以說在ELISA操作中，洗刷是最主要的關(guān)鍵技術(shù)，應(yīng)引起操作者的高度重
視，操作者應(yīng)嚴(yán)厲按要求洗刷，不得馬虎。
洗刷的方法除某些ELISA儀器配有特別的主動洗刷儀外，手工操作有浸泡式和流水沖
洗式兩種，進(jìn)程如下：
（1）浸泡式 a.吸干或甩干孔內(nèi)反響液；b.用洗刷液過洗一遍（將洗刷液注滿板孔
后，即甩去）；c.浸泡，即將洗刷液注滿板孔，放置1-2分鐘，間歇搖動，浸泡時刻不可隨
意縮短；d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)完全，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清
潔毛巾或吸水紙上拍干；e.重復(fù)操作c和d，洗刷3-4次（或按闡明規(guī)則）。在間接法中如本
底較高，可增加洗刷次數(shù)或延伸浸泡時刻。
�。�2）ELISA試劑盒微量滴定板多選用浸泡式洗刷法。洗刷液多為含非離子型洗刷劑的中性緩沖液。聚苯
乙烯載體與蛋白質(zhì)的結(jié)合是疏水性的，非離子型洗刷劑既含疏水基團(tuán)，也含親水基團(tuán)，其
疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵結(jié)合，然后削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結(jié)合，并借助
于親水基團(tuán)和水分子的結(jié)合作用，使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀況，然后脫離固相載體。洗刷
液中的非離子型洗刷劑一般是吐溫20，其濃度可在0.05%-0.2%之間，高于0.2%時，可使
包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。
�。�3）流水沖刷式 流水沖刷法最初用于小珠載體的洗刷，ELISA試劑盒洗刷液僅為蒸餾水甚至可用
自來水。洗刷時附接一特別設(shè)備，使小珠在流水沖擊下不斷地翻滾淋洗，持續(xù)沖刷2分鐘
后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2分鐘，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖刷式則比如
淋浴，其洗刷作用更為完全，且也簡便、快速。已有試驗標(biāo)明，流水沖刷式相同也適用于
微量滴定板的洗刷。洗刷時設(shè)法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔外表，洗刷作用
更佳。
