試驗有效性判斷；陰性對照：正常情況下，陰性對照孔OD450值≤0.2；陽性對照：正常情況下，陽性對照孔OD450值≥0.4；臨界值（C.O.）核算：臨界值=0.2+陰性對照均值；陰性對照OD450值大于0.2時應(yīng)放棄，如所有陰性對照OD450值均大于0.2時須重復(fù)試驗；陰性對照低于0.05時以0.05核算。

elisa試劑盒操作過程

病毒性腸炎（DVE），又名瘟（DP）是由病毒性腸炎病毒（DEV）致使的、鵝及多種雁形目禽類的一種急性、熱性、敗血性傳染病。傳達(dá)迅速，發(fā)病率和死亡率都很高，給中國養(yǎng)禽業(yè)形成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。在病毒性腸炎的免疫預(yù)防工作中，接種了病毒性腸炎疫苗后，因為多種要素也許致使免疫不發(fā)生或發(fā)生低水平病毒性腸炎病毒抗體。

B蛋白是病毒的囊膜蛋白，具有吸附、穿入、交融細(xì)胞以及細(xì)胞間傳達(dá)功用，具有杰出的反響原性及免疫原性，誘導(dǎo)機(jī)體發(fā)生高水平的體液和細(xì)胞免疫反響。本試劑盒選用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢查血清中抗病毒性腸炎病毒gB蛋白抗體IgG。用于免疫病毒性腸炎疫苗后的抗體動態(tài)水平監(jiān)測，輔導(dǎo)免疫預(yù)防工作，評價病毒性腸炎免疫情況，也可用于該病的流行病學(xué)查詢。

ELISA試劑盒試驗過程

需求自備的器件；微量移液器，微量移液器配套運(yùn)用的槍頭，用來稀釋洗滌液的500ml量筒，適用于檢查96T微孔板的酶標(biāo)儀，用于稀釋樣品的1.5ml Ep管，蒸餾水或去離子水。 樣品的制備；用樣品稀釋液將待檢血清樣品進(jìn)行100倍稀釋（建議：2μl血清樣品參加198μl樣品稀釋液中），樣品參加包被板前要充沛混勻，稀釋不一樣待檢樣品留意更換槍頭。留意：①制備血清用的血液樣本應(yīng)無溶血景象發(fā)生；②不能稀釋陰性、陽性對照。

操作過程；在A1和A2孔平分別參加100μl陰性對照；在A3和A4孔平分別參加100μl陽性對照；取100μl經(jīng)1：100稀釋好的待檢樣品參加相應(yīng)孔中，并做好記載；37℃孵育1h；將各孔的液體棄入廢液桶，每孔加250μl的洗滌液（試劑盒內(nèi)20×濃縮洗滌液需用蒸餾水或去離子水稀釋后方可運(yùn)用。如有結(jié)晶，需先溶解后，方可進(jìn)行稀釋）進(jìn)行洗板，重復(fù)5次，每次30s；加液時避免各孔間洗滌液串流影響檢查成果，盡量將孔內(nèi)洗滌液拋甩潔凈；每孔加100μl酶標(biāo)聯(lián)系物；37℃孵育1h；重復(fù)過程3.5；每孔加100μl底物液；37℃孵育10min（避光顯色）；每孔加100μl的終止液；立刻于450nm波利益測定各孔的吸光度值，即OD450值。