兔血小板因子ib3(PAFAHIB3)ELISA試劑盒 29

酶聯(lián)吸附法（ELISA）是一種靈敏、特異的學(xué)技術(shù)，常用于醫(yī)學(xué)、生物域中的抗原或檢測。其操作步驟如下：1.包被：將抗原或與酶結(jié)合，形成酶標(biāo)抗原或，并固定在固相載體上。2.洗滌：去除未結(jié)合的和雜質(zhì)。3.封閉：加入封閉液，封閉固相載體上未結(jié)合的位點(diǎn)，以非特結(jié)合。4.洗滌：去除未結(jié)合的封閉液和雜質(zhì)。5.加樣：加入待檢測的樣本，使其與固相載體上的抗原或結(jié)合。6.洗滌：去除未結(jié)合的樣本和雜質(zhì)。7.加入酶標(biāo)：使固相載體上的抗原或與酶標(biāo)結(jié)合，將抗原或間接標(biāo)記上酶。8.洗滌：去除未結(jié)合的酶標(biāo)和雜質(zhì)。9.顯色：加入底物，使酶催化底物生成有色產(chǎn)物，根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行抗原或的定性或定量檢測。需要注意的是，具體的操作步驟可能因?qū)嶒?yàn)設(shè)計(jì)、試劑品牌等不同而有所差異。在進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格按照試劑盒說明書和實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)手冊進(jìn)行操作，控制好實(shí)驗(yàn)條件和操作步驟，以實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

試劑盒性能

1. 特高：由于是抗原的特結(jié)合，因此試驗(yàn)的特很高，能夠排除其他的。

2. 靈敏度高：由于酶的放大作用，使得試驗(yàn)的靈敏度大大，能夠檢測出微量的抗原或。

3. 操作簡便：ELISA試驗(yàn)操作相對簡單，容易，適合于大規(guī)模樣本檢測。

4. 適用范圍廣：可以用于檢測各種抗原、和等生物分子。

樣品收集、處理及保存

1. ：使用不含熱原和內(nèi)的試管，操作中避免任何細(xì)胞，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. ：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。

酶聯(lián)吸附法（ELISA）是一種靈敏、特異的學(xué)技術(shù)，常用于醫(yī)學(xué)、生物域中的抗原或檢測。其作用包括：1.診斷：ELISA可以用于檢測或組織樣本中的特定分子，如抗原、抗原、標(biāo)志物等，協(xié)助進(jìn)行診斷。2.檢測：ELISA可以用于檢測血液中的，如乙型表面、人類缺陷等，用于流行病學(xué)調(diào)查和臨床診斷。3.評估：ELISA可以用于檢測后的以及劑量對的化學(xué)反應(yīng)等，幫助對患者進(jìn)行個(gè)性化。4.生物分子檢測：ELISA可以用于檢測生物分子，如蛋白質(zhì)、多肽、等，在生物醫(yī)學(xué)研究域廣泛應(yīng)用�？傊�，酶聯(lián)吸附法在醫(yī)學(xué)、生物域中具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值，是臨床診斷和中重要的輔助手段。

兔血小板因子ib3(PAFAHIB3)ELISA試劑盒 29

酶聯(lián)吸附法（ELISA）的原理是利用抗原或與酶的結(jié)合，形成酶標(biāo)抗原或，保持其活性，同時(shí)又保留酶的活性。將抗原或與酶連接成酶標(biāo)記抗原或，它既保留了活性，又保留了酶的活性；在測定時(shí)，把受檢標(biāo)本(含待測或抗原)和酶標(biāo)抗原或按一定程序與結(jié)合在固相載體表面的抗原或起反應(yīng)形成固相化抗原-酶復(fù)合物，用洗滌的使固相載體上形成的抗原-酶復(fù)合物與其它成分分離，結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢的量成一定的比例，加入酶反應(yīng)的底物后，底物被固相載體上的酶催化生為有色產(chǎn)物，通過定性或定量檢測有色產(chǎn)物的量即可確定樣品中待測的含量。

操作步驟

1)涂層:微孔板的孔涂上捕獲或抗原。

2)封閉:孔內(nèi)加入封閉劑(如牛白蛋白或羧纖維素)，非特蛋

白質(zhì)結(jié)合。

3)樣本添加:加入含有未知濃度的目標(biāo)抗原或的樣本。

4)洗滌:去除未結(jié)合的。

5)檢測添加:加入對特定抗原有特的酶標(biāo)記檢測。

6) 再次洗滌:再次去除未結(jié)合的檢測。

7)底物添加:加入酶的底物，酶作用于底物產(chǎn)生顏色變化。

8)終止反應(yīng):加入終止溶液停止酶的反應(yīng)(在某些類型的ELISA中需要)。

9) 讀數(shù):使用光譜光度計(jì)測定每個(gè)孔的吸光度(通常是在特定波長下)，吸光度

與樣本中抗原或的濃度成正比。

標(biāo)本的采集及保存

1.：全血標(biāo)本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)��?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 

2.：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)��?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 

3.細(xì)胞物上清或其它生物標(biāo)本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)��?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 (注：標(biāo)本溶血會影響**檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。) 

結(jié)果分析

根據(jù)試劑盒提供的品濃度及對應(yīng)的OD值，利用品繪制的曲線，計(jì)算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，通過計(jì)算待測樣品的濃度。

免責(zé)聲明

試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或生物體實(shí)驗(yàn)，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)， 本公司概不負(fù)責(zé)。

嚴(yán)格按照說明書操作，不同批號不可交換使用，實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作，后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。