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雞過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARγC1α)ELISA試劑盒
辣根過氧化物酶:過氧化物酶(HRP)廣泛分布于植物中,辣根中含,從辣根中提取的稱辣根過氧化物酶(HRP),是由無色酶蛋白和深棕色的鐵卟啉構成的一種糖蛋白(含糖量18%),分子量約40 000,約由300個酸組成,等電點為pH 3-9,催化反應的適pH值因供氫體不同而稍有差異,一般多在pH 5左右。此酶溶于水和50%飽和度以下的銨溶液。酶蛋白和輔基吸收光譜分別為275nm和403nm。
雞過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARγC1α)ELISA試劑盒
ELISA的基礎是抗原或的固相化及抗原或的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或仍保持其學活性,酶標記的抗原或既保留其學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的或抗原)與固相載體表面的抗原或起反應。用洗滌的使固相載體上形成的抗原復合物與中的其他分開。再加入酶標記的抗原或,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了反應的結果,使測定達到很高的度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定。
一、、靈敏、特異的;二、的重復性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底度高的固相載體;四、適用、、組織勻漿液、細胞上清液、等等多種標本類型;五、節(jié)省實驗經(jīng)費。elisa試劑盒回收率是反應待測物在樣品分析中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標液1PPM,就是1毫克/升,而作出數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關系,說明的準確度。比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機氯為29.8mg/L,則認為回收率為99%。
標記:良好的酶結合物取決于兩個條件:即價的和高活性的酶。的活性和純度對制備標記至關重要,因為特反應隨活性和純度的而增強。在酶標記中,的活性有所,故需要純度高、效及抗原親和力強的球蛋白使用親和層析提純的,可性,而且可稀釋使用,非特吸附。
雙夾心ELISA:此法與雙夾心ELISA的主要區(qū)別在于:它是采用酶標抗檢查多種大分子抗原,它不僅不必標記每一種,還可試驗的性。此法的基本程序為:① 加(Ab-1)包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干② 加待檢抗原(Ag) → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干③ 加用非同種動物生產(chǎn)的特(Ab-2)→ 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干④ 加入酶標抗Ab-2(AB-3)→ 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干⑤ 加底物液 → 37℃ 20分鐘,加終止液⑥ 用ELISA檢測儀測定OD值。
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