裝備應(yīng)考慮的主要問題及功能配置

通用實驗室離心機可能會深入到每一個技術(shù)相關(guān)實驗室，是一個潛在發(fā)展的市場，應(yīng)當(dāng)引起裝備管理方面的高度重視。在明確實驗室的主次技術(shù)需求及相應(yīng)離心方法的前提下，最大rcf、rpm、樣品量是選擇離心技術(shù)的基本參數(shù)，要在此基礎(chǔ)上考慮離心機的選型、主要功能及兼顧功能的配置。

3．1 醫(yī)學(xué)實驗室常規(guī)離心技術(shù)功能需求

3．1．1 RNA離心制備

培養(yǎng)細胞在低速離心(水平轉(zhuǎn)頭，300xg)完成細胞分離、裂解后，加RNA沉淀提取液，于4℃ ，10000～12O00xg(角轉(zhuǎn)頭，微量1．5／2．0ml Eppendorf管，或≥15ml、50ml管)分步提�。唤M織樣本需先經(jīng)勻漿預(yù)處理。

3．1．2 DNA離心制備

水平轉(zhuǎn)頭，2 000xg左右，1．5／2．0ml Eppendof管，15ml、50ml Falcon管或更大體積；再經(jīng)12000～27000xg。制備質(zhì)粒DNA：角轉(zhuǎn)頭，250ml或500m1／瓶，5000-6000xg；15-50rnl／管，12000～27000xg；4℃或特定溫度。

3．1．3 載體表達蛋白分離

角轉(zhuǎn)頭，250～500ml／瓶，4000xg；15～50ml Falcon管，3O00xg；角轉(zhuǎn)頭，50ml管／瓶，27 000xg；4℃。

3．1．4 細胞純化和亞細胞器分離

用差速離心法分離細胞器和大小差別懸殊的細胞。由低速分步到高速離心，細胞器的沉降順序是細胞核、線粒體、溶酶體、過氧化酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、核蛋白體，所有過程控溫4℃ 。

收集細胞：水平轉(zhuǎn)頭，850～1 850xg，優(yōu)選錐形底管；分離細胞核和細胞質(zhì)，3 300xg；核提取，25O00xg。進一步純化分離將聯(lián)用超速離心。

密度梯度速率沉降法分離密度相近而大小不等的細胞或__細胞器。采用合適的密度梯度介質(zhì)，水平轉(zhuǎn)頭，1OOxg左右。等密度梯度法分離細胞器，10000-30O00xg。

3．1．5 細胞學(xué)涂片離心通過在個別機型上配置細胞學(xué)涂片離心轉(zhuǎn)頭，實現(xiàn)一次4片離 12,；據(jù)細胞學(xué)特性，rc啦制在5O～1 000xg。選購時需注意離心容器的最小樣品處理量。

3．1．6 離心超濾、濃縮、抽提

配合市售離心過濾濃縮管(1．5～80ml，Coming，Millipore，Spectrum等)或樣品抽提容器使用，采用角轉(zhuǎn)頭或水平轉(zhuǎn)頭，角轉(zhuǎn)頭可使超濾膜與離心力不成直角而避免濃度極化；1 000～l2 O00xg不等，可參考所購容器的使用說明。

3．1_7 微孔板離心

酶標板、TC板、PCR板以及樣品抽提純化板的離心，在通用離心機可通過在大容量水平轉(zhuǎn)頭上配置微孔板吊架(rcf_-般將低于轉(zhuǎn)頭的額定值)或選用專門離心轉(zhuǎn)頭實現(xiàn)，≥1 O00xg。每個吊架可放1～4塊標準96孔板或更多。