
您的位置:首頁 > 技術(shù)文獻(xiàn) > 技術(shù)交流 > pcr反應(yīng)的分類
重疊區(qū)擴(kuò)增基因拼接法,是基于普通PCR 技術(shù)衍生出的一種基因融合和定點(diǎn)突變的有效方法。眾所周知,由于引物只需要與模板有效結(jié)合,尤其是5’端序列不必與模板完全配對(duì),因此擴(kuò)增引物的5’端可以添加一種甚至是兩種酶切位點(diǎn),以便于后期克隆。SOEing 法正是利用這一特點(diǎn),向兩個(gè)獨(dú)立基因摻入一段新的序列以達(dá)到兩個(gè)基因出現(xiàn)一個(gè)重疊區(qū)的目的,3’端的結(jié)合使基因融合或定點(diǎn)突變得以實(shí)現(xiàn)。
RT-PCR 為反轉(zhuǎn)錄PCR或RCR(reverse transcription PCR)和實(shí)時(shí)PCR(real time PCR)共同的縮寫。逆轉(zhuǎn)錄PCR,或者稱反轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR),是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的一種廣泛應(yīng)用的變形。在RT-PCR中,一條RNA鏈被逆轉(zhuǎn)錄成為互補(bǔ)DNA,再以此為模板通過PCR進(jìn)行DNA擴(kuò)增。
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