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標(biāo)題使用液相色譜法 解析葡萄酒中的有機(jī)酸

   

提供者：北京普瑞分析儀器有限公司    發(fā)布時(shí)間：2016/3/12   閱讀次數(shù)：245次 >>進(jìn)入該公司展臺
使用液相色譜法 解析葡萄酒中的有機(jī)酸　　
本文研究了液相色譜法定性、定量測定葡萄酒中的有機(jī)酸。運(yùn)用保留時(shí)間和加標(biāo)法定性出葡萄酒中含有的6種有機(jī)酸，如酒石酸、蘋果酸、檸檬酸、琥珀酸、乳酸、碳酸、醋酸，并運(yùn)用外標(biāo)法定量了各物質(zhì)的量，該方法操作簡便、快捷、精密度好、準(zhǔn)確度高�！　�
1 酸在葡萄酒中的作用　　
葡萄酒中只有少量的無機(jī)酸，如硫酸和磷酸，大部分酸是有機(jī)酸。葡萄酒中的酸主要以游離態(tài)或以鹽類的形式存在，葡萄酒中的酸主要有：酒石酸、蘋果酸、檸檬酸、琥珀酸、乳酸、碳酸、醋酸。酸在葡萄酒的釀造中和釀造后都占有著重要的地位，它存在于葡萄和葡萄酒中，直接作用于葡萄酒的顏色、葡萄酒的平衡感和葡萄酒的口感，酵母在發(fā)酵過程中的活性和保護(hù)葡萄酒免受細(xì)菌的侵害�！　�
常用“總酸”來衡量葡萄酒中酸的含量，一般用pH值來標(biāo)志，葡萄酒的酸度值介于2.9—3.9之間，pH值越低則酸度越高，反之，pH值越高則酸越高。釀酒葡萄中最主要的三種有機(jī)酸是酒石酸、蘋果酸、檸檬酸�！　�
在葡萄酒的釀造過程中和釀造后，葡萄酒中的醋酸、酪酸、乳酸和琥珀酸起著很重要的作用。葡萄酒中的酸（除了醋文章來源華夏酒報(bào)酸不穩(wěn)定，易揮發(fā)，會讓葡萄酒變質(zhì)）還算都是比較穩(wěn)定的酸類�！　　�
可根據(jù)檢測葡萄酒中有機(jī)酸的變化來確定和觀察葡萄酒的發(fā)酵過程�！　�
2 檢測原理　　
酒石酸、蘋果酸、乳酸、乙酸、檸檬酸、琥珀酸均屬水溶性有機(jī)酸，所以酒樣可經(jīng)過稀釋、過濾后直接進(jìn)樣，用高效液相色譜儀C18柱將各種有機(jī)酸分離，經(jīng)紫外檢測器檢測，并用標(biāo)準(zhǔn)物的保留時(shí)間進(jìn)行定性，外標(biāo)法定量測定。　　　
3 試劑　　
3.1 磷酸溶液（0.01mol/L）。　　
3.2 磷酸氫二鉀溶液（0.01mol/L）。　　
3.3 有機(jī)酸標(biāo)準(zhǔn)品（色譜純）：酒石酸、D—蘋果酸、乳酸、乙酸、檸檬酸、琥珀酸�！　�
3.4 超純水�！　�
3.5 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：　　
標(biāo)準(zhǔn)儲備液：分別稱取6種有機(jī)酸100mg用超純水，定容至10ml使其濃度為10mg/ml�！　�
標(biāo)準(zhǔn)混合液：分別吸取10 mg/ml單標(biāo)100ul，加超純水定容至1ml，使其濃度為1mg/ml�！　�
工作曲線的配制：用微量移液器分別稱取標(biāo)準(zhǔn)混合液0.0ul、100ul、200ul、300ul、400ul、500ul、600ul 并定容至1ml，各稀釋液經(jīng)0.45μm的過濾膜過濾后直接進(jìn)樣�！　�
4 檢測用儀器、設(shè)備　　
4.1 高效液相色譜儀帶紫外檢測器VARIAN PROSTAR�！　�
4.2 酸度計(jì) PHS—3CT�！　�
4.3 溶劑過濾器�！　�
4.4 可調(diào)式移液器�！　�
5 色譜條件　　
5.1 色譜柱：漢邦lunaS C18柱，250mm*4.6mm*5um�！　�
5.2 流動(dòng)相：將0.01mol/L磷酸溶液（將0.714 ml 85%H3PO4溶至1000 ml）和0.01mol/L磷酸氫二鉀溶液（將2.2822g K2HPO4?3H2O溶解后定容至1000ml），混合調(diào)至pH=2.70的緩沖溶液，臨用前過濾，脫氣后使用或亦可用在線脫氣法�！　�
5.3 柱溫：25.0℃�！　�
5.4 流速：0.8ml/min�！　�
5.5 紫外檢測波長：215nm�！　�
5.6 進(jìn)樣量：20μl�！　�
6 酒樣的處理　　
將需要檢測的葡萄酒樣經(jīng)5倍（可根據(jù)有機(jī)酸含量的高低確定稀釋的倍數(shù)）稀釋后，用0.45μm的過濾膜過濾后進(jìn)樣測定�！　�
7 分析步驟　　
7.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備將配制好的有機(jī)酸的工作曲線溶液由稀到濃分別進(jìn)樣測定，得其色譜圖�！　�
以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，做酒石酸、蘋果酸的標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算出回歸方程。　　
7.2 酒樣分析：將處理酒樣（即將待檢葡萄酒樣稀釋10倍后，用0.45um的濾膜過濾）進(jìn)樣得色譜圖�！　�
定性：對照標(biāo)準(zhǔn)色譜圖中各有機(jī)酸的保留時(shí)間定性�！　�
定量：求出酒樣中各個(gè)有機(jī)酸的峰面積，根據(jù)回歸方程計(jì)算求出其含量�！　�
8 結(jié)果計(jì)算　　
可根據(jù)要求算出樣品重量含量或體積含量，以葡萄酒小樣1#、2#為例。　　
9 注意事項(xiàng)　　
9.1 流動(dòng)相的pH微小變化對測定影響不大，但pH應(yīng)不低于2.5�！　�
9.2 應(yīng)現(xiàn)處理酒樣，現(xiàn)進(jìn)樣，否則有機(jī)酸易于揮發(fā)，影響測定的結(jié)果。

關(guān)鍵詞：使用液相色譜法  解析葡萄酒中的有機(jī)酸  

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