用途：
本試劑盒用于定量測(cè)定人血清或血漿中的P-selectin濃度。

試劑盒組成：
酶標(biāo)板（Coated Wells） 96wells Anti-P-selectin Biotin 22ml
樣品稀釋液 25ml 標(biāo)準(zhǔn)品（Standards） 1 set
TMB顯色液 11ml HRP 22ml
終止液（Stop Solution） 10ml 濃縮洗滌液（20x） 25ml
標(biāo)準(zhǔn)品已經(jīng)稀釋10倍

需要但未提供的材料
1. 可在450nm處進(jìn)行讀數(shù)的酶標(biāo)2. 儀；
3. 能精確吸取10 和200µL的移液器；
4. 可調(diào)多道（8）移液器（50－5. 200µL）；
6. 供可調(diào)多道移液器使用的試劑存放槽；
7. 洗瓶或洗板機(jī)；
8. 蒸餾水或去離子水；
9. 1升的圓柱形量筒；
10. 血清移液器：1和（10或25 mL）；
11. 移液器槍頭；
12. 紙巾；
13. 計(jì)時(shí)器，14. 用以監(jiān)控溫育步驟；
15. 處理池和消毒劑（例如：0.5% 次氯酸鈉, 10% 家用漂白水）；

注意事項(xiàng):
嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入HRP或底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。
消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。
底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。
在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
不能使用過(guò)期產(chǎn)品。
如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。

樣品：
在此檢測(cè)中，可使用人血清或血漿樣品。

準(zhǔn)備工作：
樣品稀釋10倍（10ul血清或血漿加90ul樣品稀釋液）,標(biāo)準(zhǔn)品不稀釋。
濃縮洗滌液（20X）用雙蒸水稀釋成1X（至500ml）。

操作步驟：
試劑盒應(yīng)平衡至室溫（20-25°C ）再試驗(yàn)。
取出所需反應(yīng)板。
分別加入5ul標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）、5ul已稀釋血清或血漿于反應(yīng)板孔中，輕輕混勻10秒。
每孔加入200ul Biotin anti P-selectin，輕輕混勻30秒。37°C溫育30分鐘。
洗板：甩盡板內(nèi)液體，用洗滌液洗滌反應(yīng)板，并去除水滴（在厚疊吸水紙上拍干）；這樣反復(fù)洗滌5次。
每孔加入200ul HRP,輕輕混勻10秒。37°C溫育30分鐘。
洗板：甩盡板內(nèi)液體，用洗滌液洗滌反應(yīng)板，并去除水滴（在厚疊吸水紙上拍干）；這樣反復(fù)洗滌5次。
每孔加入100ul TMB顯色液，輕輕混勻10秒鐘，置暗處室溫溫育20分鐘。
每孔加入100ul終止液（Stop Solution）。輕輕混勻30秒；15分鐘內(nèi)在450nm處讀OD值。

以O(shè)D值為縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)血清或血漿樣品的OD值可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其濃度。（曲線適用：y=ax2+bx+c）
標(biāo)本的濃度 = 標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出的濃度
檢測(cè)范圍：
1.56 ng/mL -100 ng/mL
說(shuō)明
1．試劑盒保存：-20℃（較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí)）；2-8℃（頻繁使用時(shí)）。
2．有效期：6個(gè)月
3．濃洗滌液會(huì)有鹽析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
4．剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì)，此為正�，F(xiàn)象，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
5．中、英文說(shuō)明書(shū)可能會(huì)有不一致之處，請(qǐng)以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。