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Cell Counting Kit-8簡稱CCK-8試劑盒,是一種基于WST-8的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。
1、WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數(shù)目呈線性關系。
2、WST-8是MTT的一種升級替代產品,和MTT或其它MTT類似產品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點。首先,MTT被線粒體內的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液來溶解;而WST-8和XTT、MTS產生的formazan都是水溶性的,可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次,WST-8產生的formazan比XTT和MTS產生的formazan更易溶解。再次,WST-8比XTT和MTS更穩(wěn)定,使實驗結果更加穩(wěn)定。另外,WST-8和MTT、XTT等相比,線性范圍更寬,靈敏度更高。該方法已被廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細胞增殖試驗、細胞毒性試驗以及藥敏試驗等。
總之,CCK-8的原理跟MTT其實是相同的,不同之處在于CCK-8法生成的formazan是水溶性的,不需要再吸出培養(yǎng)液加入有機溶劑溶解這個步驟,因此可以減少一定的誤差。其他優(yōu)點就是重復性優(yōu)于MTT;對細胞毒性小;為1瓶溶液,毋需預制,即開即用。但是CCK-8比MTT的價格要貴不少,所以一般來說,還是MTT法用的多。
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