常用的滅菌方法有蒸汽濕熱滅菌法、干熱滅菌法、氣體滅菌法、輻射滅菌法和過(guò)濾除菌法�？筛鶕�(jù)被滅菌物品的特性采用一種或多種方法的組合滅菌。只要產(chǎn)品允許，一般應(yīng)盡可能選用終端最終滅菌法（即產(chǎn)品分裝至包裝容器后再滅菌）滅菌。若產(chǎn)品不適合采用終端最終滅菌法，可選用過(guò)濾除菌法或無(wú)菌生產(chǎn)工藝達(dá)到無(wú)菌保證要求，只要可能，應(yīng)對(duì)非最終滅菌的產(chǎn)品作補(bǔ)充性滅菌處理（如流通蒸汽滅菌）。
一、蒸汽濕熱滅菌法
本法系指將物品置于滅菌柜內(nèi)利用高壓飽和蒸汽或流通蒸汽滅菌、過(guò)熱水噴淋等手段使微生物菌體中的蛋白質(zhì)、核酸發(fā)生變性而殺滅微生物的方法。流通蒸汽不能完全殺滅細(xì)菌孢子，一般可作為不耐熱無(wú)菌產(chǎn)品的輔助滅菌手段。高壓蒸汽滅菌該法滅菌能力強(qiáng)，為熱力學(xué)滅菌中最有效、應(yīng)用最廣泛的滅菌滅菌方法。藥品、容器、培養(yǎng)基、無(wú)菌衣、膠塞以及其他其它遇高溫和潮濕不發(fā)生變化或損壞的物品，均可用本法滅菌。流通蒸汽不能完全殺滅細(xì)菌孢子，一般可作為不耐熱無(wú)菌產(chǎn)品的輔助滅菌手段。
1. 蒸汽滅菌的有關(guān)參數(shù)
（1）D值
D值即微生物的耐熱參數(shù)，系指一定溫度下，殺滅90%微生物所需的時(shí)間，以分表示。D值越大，表明該微生物的耐熱性越強(qiáng)。不同的微生物在不同環(huán)境條件下具有不同的D值。
滅菌方法驗(yàn)證時(shí)，微生物的耐熱參數(shù)一般使用D121℃ 。
（2）Z值
Z值即滅菌溫度系數(shù)，系指使某一種微生物的D值下降一個(gè)對(duì)數(shù)單位，滅菌溫度應(yīng)升高的值（℃），通常取10℃。它被用于定量的描述孢子對(duì)滅菌溫度變化的敏感程度，Z值越大孢子對(duì)溫度的敏感性越弱。
（3）FT值
FT值系指給定的Z值下，滅菌程序所賦予待滅菌品在溫度T下的滅菌時(shí)間，以分表示。
LgP=lgN0- FT/DT
式中P為滅菌產(chǎn)品中微生物存活的概率。
N0為產(chǎn)品滅菌前微生物的數(shù)量。
滅菌溫度高時(shí)，F(xiàn)T值就小，滅菌溫度較低時(shí)，所需FT值就大。
（4）滅菌率L
L值系指在某溫度下滅菌1分鐘所相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間（分）， 即F0和FT的比值（L= F0/FT = D121℃ /DT）。不同Z值、不同溫度下的L值是不同的，滅菌率均可查得。
（5） F0值
F0值即標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間，系指滅菌過(guò)程賦予待滅菌物品在121℃下的等效滅菌時(shí)間，即T=121℃、Z=10℃時(shí)的FT值。121℃為標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)，F(xiàn)0值即為標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間，以分表示。一個(gè)滅菌程序的總的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間F0，應(yīng)包括加熱及冷卻過(guò)程。它可以用滅菌率對(duì)時(shí)間求積分的方法計(jì)算而得。
F0=∫t2t1L•dt
式中dt為測(cè)定的間隔時(shí)間，相鄰兩次的間隔時(shí)間通常取1分鐘。
100℃以下，L值可以忽略。F0是作為滅菌過(guò)程中監(jiān)控物品達(dá)到無(wú)菌保證的重要手段�，F(xiàn)代滅菌器上設(shè)置有F0值自動(dòng)顯示系統(tǒng)。
上述參數(shù)及其關(guān)系為蒸汽滅菌程序的設(shè)計(jì)、驗(yàn)證及日常滅菌效果的監(jiān)控提供了理論依據(jù)。
高壓蒸汽濕熱滅菌條件一般通常采用121℃×20min或116℃×40min的程序，也可采用其它溫度和時(shí)間參數(shù)�？傊�，必須保證物品滅菌后的SAL≤10-6�？傊�，必須驗(yàn)證所采用的滅菌條件能達(dá)到無(wú)菌保證要求。在實(shí)際應(yīng)用中，對(duì)熱穩(wěn)定的產(chǎn)品或物品，可采用過(guò)度殺滅法菌，其SAL應(yīng)≤10-1212。對(duì)熱極為敏感的產(chǎn)品，可的允許標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間F0可低于8min。，但對(duì)F0低于8的滅菌程序要求應(yīng)在生產(chǎn)全過(guò)程中，對(duì)產(chǎn)品中污染的微生物嚴(yán)加監(jiān)控，并采取各種措施防止耐熱菌污染及降低微生物污染水平，以確保被滅菌滅菌產(chǎn)品達(dá)到無(wú)菌保證要求。滅菌物品的表面必須潔凈，不得污染有機(jī)物質(zhì)。必要時(shí)，外表應(yīng)用適宜的包皮寬松的包裹，特別是燒瓶、試管等容器的塞子要防止脫落。滅菌柜內(nèi)的物品裝載方式應(yīng)保證滅菌蒸汽徹底穿透物品，且不影響蒸汽穿透速度和滅菌后的干燥程度。滅菌柜中的空氣應(yīng)排空并被飽和蒸汽完全替代,以保證表壓與滅菌柜內(nèi)壓力的一致。
采用濕熱滅菌時(shí)[d1] ，被滅菌物品應(yīng)有適當(dāng)?shù)陌�裝和裝載方式，保證滅菌的有效性和均一性。
蒸汽滅菌法濕熱滅菌工藝驗(yàn)證時(shí)，應(yīng)進(jìn)行熱分布試驗(yàn)、熱穿透試驗(yàn)和生物指示劑驗(yàn)證試驗(yàn)。以確定滅菌柜空載及不同裝載時(shí)腔室里中的熱分布狀況及可能存在的冷點(diǎn)；在空載條件下，確認(rèn)121℃時(shí)腔室的各點(diǎn)的溫度差值應(yīng)≤±1℃、；使用插入實(shí)際物品或模擬物品內(nèi)的溫度探頭，確認(rèn)滅菌柜在不同裝載時(shí)，最冷點(diǎn)物品的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間（F0）達(dá)到設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)；用生物指示劑進(jìn)一步確認(rèn)在不同裝載時(shí)冷點(diǎn)處的滅菌物品達(dá)到無(wú)菌保證水平。本法常用的生物指示劑為嗜熱脂肪芽孢桿菌孢子（Spores of Bacillus stearothermophilus）。
二、干熱滅菌法
本法系指物品于干熱滅菌柜、隧道滅菌器等設(shè)備中、利用干熱空氣達(dá)到殺滅微生物或消除熱原物質(zhì)的方法，在干熱滅菌柜、連續(xù)性干熱滅菌系統(tǒng)或烘箱等設(shè)備中進(jìn)行滅菌�？捎眠m用于耐高溫但不宜用蒸汽濕熱滅菌法滅菌的物品的滅菌，也是最為有效的除熱原方法之一，如玻璃器具、金屬制容器、纖維制品、固體試藥、液狀石蠟等均可采用本法滅菌。
干熱滅菌條件一般為160～170℃×120min以上、170～180℃×60min以上或250℃×45min以上，也可采用其它溫度和時(shí)間參數(shù)�？傊�，應(yīng)保證滅菌后的產(chǎn)品其SAL≤10-6。干熱過(guò)度殺菌殺滅后產(chǎn)品的SAL應(yīng)≤10-12，此時(shí)物品一般無(wú)需進(jìn)行滅菌前污染微生物的測(cè)定。干熱滅菌250℃ 45min的干熱滅菌也可除去無(wú)菌產(chǎn)品包裝容器及有關(guān)生產(chǎn)灌裝用具中的熱原物質(zhì)。
采用干熱滅菌時(shí)，被滅菌物品應(yīng)有適當(dāng)?shù)陌�裝和裝載方式，保證滅菌的有效性和均一性。
用本法滅菌的物品表面必須潔凈，不得污染有機(jī)物質(zhì)，必要時(shí)外面應(yīng)用適宜的包皮寬松包裹。配有塞子的燒瓶、試管等容器口應(yīng)有金屬箔或紗布等包皮包裹，并用適宜的方式捆扎，防止脫落。干熱滅菌箱內(nèi)物品排列不可過(guò)密，保證熱能均勻穿透全部物品。
干熱滅菌法驗(yàn)證與蒸汽濕熱滅菌法相同，應(yīng)進(jìn)行熱分布試驗(yàn)、熱穿透試驗(yàn)、生物指示劑驗(yàn)證試驗(yàn)或細(xì)菌內(nèi)毒素滅活驗(yàn)證試驗(yàn)。以確認(rèn)滅菌柜中的溫度分布應(yīng)符合設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)、確定最冷點(diǎn)位置、確認(rèn)最冷點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間（FH）能保證達(dá)到設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)并達(dá)到SAL要求。常用的生物指示劑為枯草芽孢桿菌孢子（Spores of Bacillus subtilis）。細(xì)菌內(nèi)毒素滅活驗(yàn)證試驗(yàn)是證明除熱原過(guò)程有效性的試驗(yàn)。一般將不小于1000單位的細(xì)菌內(nèi)毒素加入待去熱原的物品中，證明該去熱原工藝能使內(nèi)毒素至少下降3個(gè)對(duì)數(shù)單位。細(xì)菌內(nèi)毒素滅活驗(yàn)證試驗(yàn)所用的細(xì)菌內(nèi)毒素一般為大腸桿菌內(nèi)毒素（Escherichia coli endoxin）。驗(yàn)證時(shí)，一般采用最大裝載方式。