用于檢測水樣中（底下水、井水、海水）中多溴化聯(lián)苯的檢測。如果要檢測其它樣品請聯(lián)系我公司取得相關(guān)前處理資料。
PBDE檢測試劑盒的原理是酶聯(lián)免疫反應(yīng)檢測方法。樣品和結(jié)合有PBDE抗體的磁性顆粒一起加入一次性玻璃試管。然后加入PBDE酶結(jié)合物。樣品中的PBDE與PBDE酶結(jié)合物中的PBDE競爭磁性顆粒上抗體的結(jié)合位點。反應(yīng)20分鐘。利用磁場固定住試管中的磁性顆粒除去沒有結(jié)合的試劑。加入底物（過氧化氫和TMB）來檢測樣品中的PBDE.結(jié)合在PBDE抗體上的PBDE酶結(jié)合物催化底物產(chǎn)生有色物質(zhì)。孵育20分鐘加入酸終止反應(yīng)。結(jié)合物中的PBDE和樣品中的PBDE是競爭關(guān)系所以顯色的強度和樣品中PBDE的濃度成反比。

 多溴化聯(lián)苯檢測試劑盒說明書試劑盒組成

儲存和穩(wěn)定性

檢測試劑盒應(yīng)該置于2–8°C保存，不冷凍保存。在有效期內(nèi)都可以使用。在試劑盒中不要求儲存條件的可以分開放置，這樣可以節(jié)省冰箱的空間。檢測試驗結(jié)束后的垃圾按當(dāng)?shù)氐姆ㄒ?guī)處理。

劑盒未提供的材料

1、250-1000ul的移液器及吸頭

2、震蕩器

3、磁力分離架

4、450nm的酶標儀

樣品信息

這個方法用于檢測水樣。如果要檢測其它樣品需要修改檢測步驟并驗證。樣品保存在一氯醋酸和其它酸中，在檢測前要用強堿如：6N NaOH中和。如果樣品中的PBDE的濃度超過1 ppb，樣品需要稀釋后再測定。推薦使用零標準/樣品稀釋液對樣品進行10倍或更大的稀釋。例如，在一個試管中加入100 μL的樣品和900 μL零標準/樣品稀釋液。在檢測前要充分混合。根據(jù)操作步驟進行檢測，在獲的*終的結(jié)果時要乘以稀釋倍數(shù)10.

以下物質(zhì)的濃度不大于1000 ppm時對檢測結(jié)果沒有明顯影響：銅、鋅、鎂、鈣、錳、磷酸鹽、氯化鈉、硫酸鹽、硝酸鹽。腐植酸和硫酸亞鐵的濃度達到100p pm時對檢測結(jié)果沒有影響。

試劑制備

在檢測時所有試劑都要恢復(fù)到室溫。結(jié)合有抗體的磁性顆粒在使用前要混合。

注意

和所有的免疫檢測方法一樣，穩(wěn)定的技術(shù)是一個良好的操作的關(guān)鍵。為了得到*精確的結(jié)果要確保每個孔的操作都要一致。試劑直接加入孔的底部，吸頭不要和孔中其他液體接觸，這可以保證每個孔中的試劑的量是一致的。添加液體時每個樣品都要使用新的吸頭，同時要避免微孔壁上的液滴和吸頭上的液滴接觸來避免交叉污染。在震蕩過程中避免產(chǎn)生泡沫。

磁性分離架有兩部分構(gòu)成：這個較高的架子可以安全的固定試管和一個低的分離器（這個分離器包含磁石，用于吸附包被抗體的磁性顆粒）。在孵育過程中從低的分離器上移除了較高的架子，這樣可以使磁性顆粒保持懸浮.在分離步驟中這個架子和分離器被安裝在一起,可以把磁性顆粒吸附到測試管的邊上。

為了獲得*佳的測定結(jié)果,在分離步驟中一定要小心，保持每個步驟都一致。從分離器上拿起支架，慢慢翻轉(zhuǎn)來傾倒測試管中的液體，動作一定要平緩保證液體是沿著試管的一邊持續(xù)的流出。一直到支架反了過來的時候放在吸水墊上面使試管壁上的液體被吸出。提起來支架然后再放到吸水墊上面，反復(fù)操作幾次確保試管壁上的液體全部被移除。在吸取包被抗體的磁性顆粒前要把其混均勻。標準和對照管在不使用時要把蓋蓋上阻止液體揮發(fā)。不要使用過期產(chǎn)品，避免終止液與皮膚和粘膜接觸，如果不小心接觸了請馬上用大量的水沖洗。

限制

Abraxis PBDE檢測試劑盒可以不同程度地檢測不同的PBDE。相關(guān)數(shù)據(jù)請看特異性數(shù)據(jù)。此試劑盒可以提供檢測結(jié)果。和其他方法一樣，對于陽性樣品需要用傳統(tǒng)的方法(GC,HPLC, etc...)來驗證。吸取磁性顆粒的總時間要小于2分鐘或更少，因此要根據(jù)自己的能力來確定在每次檢測時測幾個樣品，一定要保證磁性顆粒在2分鐘內(nèi)吸取完。

質(zhì)量控制

試劑盒中提供了一個濃度為0.25 ppb 的PBDE溶液。推薦在每次檢測時都對這個溶液做和樣品一樣的處理進行檢測。同時實驗室應(yīng)該建立可以接受的限定。

測試步驟

在操作之前一定要仔細閱讀以上內(nèi)容。

1、對于水樣可以直接按此說明書處理，如果是其它樣品顆粒請聯(lián)系我公司索取特定的樣品處理方法。

2、標記測試管，使標準、樣品和對照區(qū)分開。

3、在對應(yīng)的測試管中加入250 uL標準，對照或樣品。

4、混勻包被有PBDE抗體的磁性顆粒溶液，然后每個測試管加入500 uL。

5、渦旋震蕩1到2秒，盡量不要產(chǎn)生氣泡。

6、在室溫下孵育20分。

7、在每個測試管加入250 ul PBDE 酶結(jié)合物。

8、渦旋震蕩1到2秒，盡量不要產(chǎn)生氣泡。

9、在室溫下孵育20分。

10、在磁性分離器上分離2分鐘。

11、從分離器上拿起支架，慢慢翻轉(zhuǎn)來傾倒測試管中的液體，動作一定要平緩保證液體是沿著試管的一邊持續(xù)的流出。一直到支架反了過來的時候放在吸水墊上面使試管壁上的水被吸出。提起來支架然后再放到吸水墊上面，反復(fù)操作幾次確保試管壁上的液體全部被移除。

12、每個測試管中加入1 mL洗液，震蕩1-2秒，再在磁性分離器上分離2分鐘。

13、用同樣的操作手法輕輕倒出所有測試管中的液體，并輕輕地把剩余液體吸取干凈。

14、重復(fù)10和11一次。

15、從分離器上拿下支架，然后每個測試管中加入500 uL的顯色液。

16、震蕩1到2秒，盡量不要產(chǎn)生氣泡。

17、在室溫下孵育20分。

18、在每個測試管中加入500 uL的終止液。

19、在一個干凈的測試管中加入1 mL洗液，作為步驟17中的空白。

20、在加入終止液15分鐘后，在450nm的分光光度計測定。

 多溴化聯(lián)苯檢測試劑盒說明書結(jié)果

手工計算

1、 計算每個標準的吸光度值。

2、 計算每個標準的%B/Bo（每個標準的吸光度值除以 稀釋劑/零標準 的吸光度值）。

3、 以每個標準的%B/Bo值的Log 為Y軸，PBDE濃度的對數(shù)為X軸作圖繪制標準曲線。

4、 把樣品或?qū)φ盏?/font>%B/Bo插入到標準曲線就可以計算出結(jié)果。

光度計分析儀

一些公司已經(jīng)生產(chǎn)出可以自動繪制標準曲線的吸光度分析儀，并且配有詳細的操作說明書。為了用這個設(shè)備從Abraxis 多溴化聯(lián)苯 檢測試劑盒獲得檢測結(jié)果，允許對部分參數(shù)進行設(shè)定。

操作性能數(shù)據(jù)

敏感性

 PBDE檢測試劑盒的檢測限是位于90% B/Bo 時對應(yīng)的濃度17 ppt。