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人干擾素誘導(dǎo)蛋白10（CXCL10/IP-10）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）

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上傳時間：2015/9/25 9:19:59

文件類型：file

上 傳 者：恒遠(yuǎn)免疫學(xué)第三方檢測中心

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試劑盒使用說明書
本試劑僅供研究使用      
目的：本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關(guān)液體樣本中干擾素誘導(dǎo)蛋白10（CXCL10/IP-10）的含量。
人干擾素誘導(dǎo)蛋白10（CXCL10/IP-10）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）實驗原理：
 本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人干擾素誘導(dǎo)蛋白10（CXCL10/IP-10）水平。用純化的人干擾素誘導(dǎo)蛋白10（CXCL10/IP-10）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入干擾素誘導(dǎo)蛋白10（CXCL10/IP-10），再與HRP標(biāo)記的CXCL10/IP-10抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的干擾素誘導(dǎo)蛋白10（CXCL10/IP-10）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人干擾素誘導(dǎo)蛋白10（CXCL10/IP-10）濃度。
試劑盒組成：
試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存
說明書 1份 1份  
封板膜 2片（48） 2片（96）  
密封袋 1個 1個  
酶標(biāo)包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品：135ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存
酶標(biāo)試劑 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
樣品稀釋液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
終止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
濃縮洗滌液 （20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存
人干擾素誘導(dǎo)蛋白10（CXCL10/IP-10）酶聯(lián)免疫分析（ELISA）樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆�。�?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

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