平衡過程中，將流速緩慢地提高 
     　　用流動相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線（緩沖鹽或離子對試劑度如果較低，則需要較長的時間來平衡）

         色譜柱的再生 　　進(jìn)行色譜柱再生時，應(yīng)使用一個謙價的泵，我們建議最好不使用您的高效液相色譜儀上的泵。 
     表1　建議用來沖洗的溶劑體積
     色譜柱尺寸 柱體積 所用溶劑的體積 
      125-4 1.6ml 30ml

    250-4 3.2ml 60ml

   250-10 -20ml 400ml

     請根據(jù)下表選擇您的再生方法：

     極性固定相（如Si，NH2＊，DIOL基色譜填料）的再生：

     正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水＊＊

     非極性固定相（如反相色譜填料RP－18，RP－8，CN等）的再生：

     水→乙腈→氯仿（或異丙醇）→乙腈→水

    0.05M稀硫酸可以用來清洗已污染的色譜柱 

  注意：

     在對NH2改性的色譜柱進(jìn)行再生時，由于NH2可能成銨根離子的形式存在，因此應(yīng)該在水洗后用0.1M的氨水沖洗，然后再用水沖洗至堿溶液完全流出。

     ＊＊如果簡單的有機(jī)溶劑/水的處理不能夠完全洗去硅膠表面吸附的雜質(zhì)，用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。