熒光分光光度計工作原理：
由光源氙弧燈發(fā)出的光通過切光器使其變成斷續(xù)之光以及激發(fā)光單色器變成單色光后，此光即為熒光物質(zhì)的激發(fā)光，被測的熒光物質(zhì)在激發(fā)光照射下所發(fā)出的熒光，經(jīng)過單色器變成單色熒光后照射于測樣品用的光電倍增管上，由其所發(fā)生的光電流經(jīng)過放大器放大輸至記錄儀，激發(fā)光單色器和熒光單色器的光柵均由電動機帶動的凸輪所控制，當(dāng)測繪熒光發(fā)射光譜時，將激發(fā)光單色器的光柵，固定在最適當(dāng)?shù)募ぐl(fā)光波長處，而讓熒光單色器凸輪轉(zhuǎn)動，將各波長的熒光強度訊號輸出至記錄儀上，所記錄的光譜即發(fā)射光譜（emission spectrum），簡稱熒光光譜。
當(dāng)測繪熒光激發(fā)光譜時，將熒光單色器的光柵固定在最適當(dāng)?shù)臒晒獠ㄩL處，只讓激發(fā)光單色口的凸輪轉(zhuǎn)動，將各波長的激發(fā)光的強度訊號輸出至記錄儀，所記錄的光譜即激發(fā)光譜（emission spectrum）。
當(dāng)進行樣品溶液的定量分析時，將激發(fā)光單色器固定在所選擇的激發(fā)光波長處，將熒光單色器調(diào)節(jié)至所選擇的熒光波長處，由記錄儀得出的信號是樣品溶液的熒光強度。