適于cDNA合成、表達(dá)譜及其他需要從超高豐度的rRNA和tRNA中分離mRNA的操作。GenElute mRNA試劑盒為從之制備的總RNA中分離多腺苷酸化mRNA，或直接從哺乳動(dòng)物細(xì)胞和組織中分離多腺苷酸化mRNA提供了方便的操作方法。直接制備mRNA時(shí)，需采用SDS/蛋白酶K降解法破碎細(xì)胞或組織，從而釋放出RNA并去除RNases。這兩種試劑盒均采用與1 μm聚苯乙烯微珠共價(jià)偶聯(lián)的oligo dT30，通過雜交法捕獲多腺苷酸化的mRNA。在雜交過程中，聚苯乙烯微珠繼續(xù)保持懸浮狀態(tài)，無需進(jìn)行混合或振蕩（這在纖維素或磁微粒方法中較為常見）。oligo(dT) 聚苯乙烯微珠（2-3步）可以采用比常用的oligo(dT) 纖維素微粒法（至少10步）更少的嚴(yán)格洗滌步驟，獲得更純凈的mRNA，聚苯乙烯的種類是可選的。采用GenElute試劑盒時(shí)，基于mRNA的復(fù)合物在一個(gè)微量離心濾器上洗滌，然后在10 mM Tris-HCL, pH 7.5.緩沖液洗脫。通過上述任一種試劑盒制備的mRNA均適用于Northern雜交、表達(dá)陣列或芯片雜交、cDNA合成、文庫構(gòu)建等廣泛的下游應(yīng)用。

純化所得的mRNA可直接用于Northern分析、反轉(zhuǎn)錄、PCR、陣列標(biāo)記及其他常規(guī)應(yīng)用。

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GenElute is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC