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您的位置:首頁 > 技術文獻 > 產品說明 > 膠原酶A

標題膠原酶A

   

提供者:上海篤瑪生物科技有限公司    發(fā)布時間:2024/7/30   閱讀次數:30次 >>進入該公司展臺
  

一般描述

膠原酶是一種蛋白酶,可切割三螺旋結構的蛋白,即膠原蛋白。[1]溶組織梭菌 產生六種類型的膠原酶,即α、β、γ、δ、ε和λ。這些膠原酶對結締組織具有活性,并且對明膠的反應性高于膠原。[2]來自溶組織梭菌( Clostridium histolyticum )的膠原酶具有非常強的活性,它在低至4-10°C的溫度下可從兩端消化膠原蛋白。[3]

特異性

膠原酶可降解天然膠原蛋白。梭菌蛋白酶,一種胰蛋白酶樣酶,以及中性蛋白酶也會降解其他蛋白質。
酶活性:
膠原酶活性:>0.15U/mg(根據Wünsch)(+ 25℃,4-苯基-偶氮芐-氧羰基-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg作為底物)
污染酶活性:胰蛋白酶、梭菌蛋白酶和中性蛋白水解酶活性
膠原酶A具有平衡的酶活性比例。

應用

來自 溶組織梭菌 的膠原酶被廣泛應用于:
  • 分解許多類型的組織(,肺,心臟,肌肉,骨骼,脂肪組織,肝臟,腎臟,軟骨,乳腺,胎盤,血管,腦,腫瘤,臍帶)
  • 制備但細胞懸浮液用于建立原代細胞培養(yǎng)系統(tǒng)。[4]當產量、活力和功能性很重要時,推薦使用膠原酶A。[5][6]制備來自多種組織的細胞,如肝細胞、脂肪細胞、胰島細胞、上皮細胞、肌細胞、內皮細胞 。但是,應根據經驗確定各批次的酶是否適用于特定組織的解離。[7][8]

單位定義

內容物
凍干粉,非無菌
單位定義:來自Roche的膠原酶以Wünsch單位表示(在+25°C 下,每分鐘使用Wünsch底物生成1 μmol產物)。
通常,膠原酶活性以Mandl單位表示(在+37°C下,在5小時內從膠原中釋放1 μmol亮氨酸)。
遺憾的是,兩種活性單位之間沒有一致的換算因數,因為Mandl單位部分取決于膠原酶制劑中污染蛋白酶的濃度,而這是一個不確定變量。實際上,高純度膠原酶制劑的Mandl單位比酶活要低于粗制膠原酶制劑。梭菌 制劑的換算因數通常約為1:1800(例如 ,批次的 梭菌 膠原酶含有約0.15 Wünsch U/mg和250 Mandl U/mg)。

制備說明

激活劑:Ca2+
抑制劑:
膠原酶抑制劑:EDTA,EGTA,Cys,His,DTT,
血清不抑制膠原酶。
梭菌蛋白酶抑制劑:TLCK
胰蛋白酶抑制劑:抑肽酶、胰蛋白酶抑制劑(蛋清、大豆)、血清
工作濃度:0.5至2.5 mg/ml
儲存條件(工作溶液):-15至-25 °C
羅氏建議僅重新配立即使用所需的凍干粉的量。重新配制的溶液可以在-15至-25 °C下儲存長達一周。因為重新配制后活性降低了,所以要避免反復凍融。

重懸

可重懸于任意平衡鹽溶液(如,HBSS)

儲存及穩(wěn)定性

保存于密閉容器內,置于干燥通風處

其他說明

僅用于生命科學研究。不可用于診斷。
裝運條件可能會有所不同。

關鍵詞:穩(wěn)定性強  特異性強    靈敏度高  

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