人基質(zhì)金屬蛋白酶-13elisa試劑盒使用說明書

公司產(chǎn)品涵蓋ELISA研發(fā)、細胞培養(yǎng)，各種生化試劑、各種酶類、分子生物學試劑盒、培養(yǎng)基、自產(chǎn)實驗室耗材、小型儀器等。此外（公司名稱）還代sigma,R&D,ScienCell,ATCC,wak0,omega，Worthington、MBI、Bioworld、Calendon等國外各類知名公司的產(chǎn)品。

本試劑盒僅供研究使用。
人elisa試劑盒檢測范圍： 96T
　10μg/L -320μg/L

使用目的：
　　本試劑盒用于測定人細胞上清液、血漿及相關液體樣本中基質(zhì)金屬蛋白酶-13（MMP-13）含量。
實驗原理
　　本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人基質(zhì)金屬蛋白酶-13（MMP-13）水平。用純化的人基質(zhì)金屬蛋白酶-13（MMP-13）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入基質(zhì)金屬蛋白酶-13（MMP-13），再與HRP標記的基質(zhì)金屬蛋白酶-13（MMP-13）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的基質(zhì)金屬蛋白酶-13（MMP-13）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人基質(zhì)金屬蛋白酶-13（MMP-13）濃度。
人elisa試劑盒組成
1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 6ml×1瓶
2 酶標試劑 6ml×1瓶 8 標準品（640μg/L） 0.5ml×1瓶
3 酶標包被板 12孔×8條 9 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1瓶 10 說明書 1份
5 顯色劑A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2張
6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1個
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
人elisa試劑盒操作步驟
標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

公司本著服務科研，以質(zhì)量求生存，以信譽求發(fā)展的精神，精益求精，力求做到更好。全體員工孜孜不倦為國內(nèi)科研事業(yè)單位以及高校等提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品服務，以盡一份綿薄之力！在廣大客戶的支持和全體員工的努力下，公司正在日益發(fā)展和壯大。 不管是過去還是現(xiàn)在和將來，公司全體員工將再接再厲，以優(yōu)質(zhì)的服務態(tài)度，全新的精神面貌，為廣大新老客戶，提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和售后服務，讓我們攜手共創(chuàng)美好未來！