豚鼠白介素2受體α(IL-2Rα/CD25)ELISA試劑盒

ELISA試劑盒基于抗原之間的特異結(jié)合反應(yīng)，以用于測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原，而則為純化抗原動(dòng)物后的多克隆和使用雜交瘤技術(shù)的單克隆，而抗原或的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過(guò)各種化學(xué)合成制備。ELISA試劑盒的作用ELISA試劑盒是一種用于體外定性檢測(cè)人或中的特定的試劑盒，例如抗人類戊型（HEV）IgMELISA檢劑盒。ELISA試劑盒具有靈敏度高、特好、操作簡(jiǎn)便、安全、快速等優(yōu)點(diǎn)，可以用于檢測(cè)類因子、、等，在臨床診斷、科研和生物制品檢測(cè)等域具有廣泛的應(yīng)用。

90分鐘一步法ELISA試劑盒可以適用于、、組織勻漿、細(xì)胞上清液等樣本類型。這些樣本可以用于檢測(cè)、和其他微生物等病原體，以及、自身性等病理情況。同時(shí)，ELISA試劑盒還可以用于檢測(cè)濃度、維生素等營(yíng)養(yǎng)，以及污染物等有害的殘留量。需要注意的是，不同樣本類型和檢測(cè)項(xiàng)目可能對(duì)ELISA試劑盒的靈敏度和特產(chǎn)生影響，因此在選擇使用ELISA試劑盒時(shí)需要根據(jù)具體情況進(jìn)行選擇。

酶聯(lián)吸附法（ELISA）的原理是利用抗原或與酶的結(jié)合，形成酶標(biāo)抗原或，保持其活性，同時(shí)又保留酶的活性。將抗原或與酶連接成酶標(biāo)記抗原或，它既保留了活性，又保留了酶的活性；在測(cè)定時(shí)，把受檢標(biāo)本(含待測(cè)或抗原)和酶標(biāo)抗原或按一定程序與結(jié)合在固相載體表面的抗原或起反應(yīng)形成固相化抗原-酶復(fù)合物，用洗滌的使固相載體上形成的抗原-酶復(fù)合物與其它成分分離，結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢的量成一定的比例，加入酶反應(yīng)的底物后，底物被固相載體上的酶催化生為有色產(chǎn)物，通過(guò)定性或定量檢測(cè)有色產(chǎn)物的量即可確定樣品中待測(cè)的含量。

ELISA試劑盒的操作步驟如下：1.包被：用PH9.6的CBS包被液稀釋包被抗原至5μg/ml，酶標(biāo)板中每孔加入50μl，室溫、4℃或37℃過(guò)夜包被。2.洗滌：棄包被液（拍干，再用無(wú)塵紙吸干），用PH7.2-7.4的1×PBST洗滌液洗板3次（每孔均要加滿），每次3min~5min。3.封閉：每孔加封閉液（1%BSA）250μl，37℃封閉2h。4.洗滌：用1×PBST洗滌液洗板3次，每次3min~5min。5.結(jié)合一抗：用1×PBST緩沖液1∶1000稀釋被檢，每孔100μl，要設(shè)立陰性對(duì)照，37℃孵育1.5h。6.洗滌：同上。7.結(jié)合酶標(biāo)二抗：每孔加1×PBST緩沖液1000倍稀釋的酶標(biāo)二抗羊抗鼠IgG-HRP（稀釋倍數(shù)根據(jù)產(chǎn)品不同有所不同，可按說(shuō)明書進(jìn)行）50μl，37℃孵育1h.8.洗滌：同上。9.顯色：每孔加底物溶液（TMB）50μl，置室溫避光顯色10min。10.待顯色后，每孔加入50μl終止液（2mol/L H2SO4）終止反應(yīng)。使用酶標(biāo)儀讀取450nm的OD值，以確定水平。以上步驟僅供參考，具體操作請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況和產(chǎn)品說(shuō)明書進(jìn)行。

 操作步驟

1. 工作：將試劑盒從冰箱中取出，室溫放置30分鐘，使試劑盒恢復(fù)至室溫。同時(shí)好實(shí)驗(yàn)所需的材料和。2. 加樣：在酶標(biāo)板的弟1個(gè)孔中加入品50μL，然后在后續(xù)的孔中依次加入待測(cè)樣本50μL。3. 溫育：將酶標(biāo)板密封，在37℃下溫育30分鐘。4. 洗滌：用洗滌液清洗酶標(biāo)板，共洗滌5次。每次洗滌后，用吸水紙輕輕吸干孔內(nèi)。5. 加酶：在每個(gè)孔中加入酶標(biāo)物100μL。6. 溫育：再次將酶標(biāo)板密封，在37℃下溫育30分鐘。7. 洗滌：用洗滌液清洗酶標(biāo)板，共洗滌5次。每次洗滌后，用吸水紙輕輕吸干孔內(nèi)。8. 加底物：在每個(gè)孔中加入底物A液50μL，再加入底物B液50μL。9. 終止反應(yīng)：在每個(gè)孔中加入終止液50μL。10. 檢測(cè)：用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下讀取各孔的吸光度（OD值）。

豚鼠白介素2受體α(IL-2Rα/CD25)ELISA試劑盒

結(jié)果分析

根據(jù)品和樣本的OD值，繪制曲線，從而計(jì)算出樣本中角蛋白1（KRT1）的濃度。具體分析可參劑盒說(shuō)明書或相關(guān)文獻(xiàn)。

注意事項(xiàng)

1. 在操作中，應(yīng)保持酶標(biāo)板的干燥，避免水分進(jìn)入孔內(nèi)。2. 加樣時(shí)需確保加樣準(zhǔn)確、無(wú)氣泡產(chǎn)生。3. 溫育和洗滌中需嚴(yán)格控制時(shí)間和溫度，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。4. 在使用酶標(biāo)儀讀取OD值時(shí)，需確保波長(zhǎng)設(shè)置正確，避免誤差產(chǎn)生。5. 在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中，需保持操作的清潔和整潔，避免交叉污染。