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使用說明書
試劑盒采用雙一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被白蛋白(ALB)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
雙夾心ELISA:此法與雙夾心ELISA的主要區(qū)別在于:它是采用酶標(biāo)抗檢查多種大分子抗原,它不僅不必標(biāo)記每一種,還可試驗(yàn)的性。此法的基本程序?yàn)椋孩?加(Ab-1)包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干② 加待檢抗原(Ag) → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干③ 加用非同種動(dòng)物生產(chǎn)的特(Ab-2)→ 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干④ 加入酶標(biāo)抗Ab-2(AB-3)→ 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干⑤ 加底物液 → 37℃ 20分鐘,加終止液⑥ 用ELISA檢測儀測定OD值。
樣品收集、處理及保存
2. :EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
3. 37℃恒溫箱
ELISA:本法主要用于檢測IgM。由于IgM出現(xiàn)于感染早期,所以檢測出IgM,則可作為某種的早期診斷。ELISA根據(jù)所用標(biāo)記不同可分為標(biāo)記抗原、標(biāo)記、標(biāo)記抗ELISA等幾種,其中以標(biāo)記抗原ELISA比較有代表性,該的主要程序?yàn)椋孩?用抗u鏈(抗IgM重鏈)包被→37℃ 60分鐘后置4℃過夜,洗滌三次、拋干② 加待檢 → 37℃ 2小時(shí),洗滌三次、拋干③ 加酶標(biāo)抗原 → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干④ 加底物液 → 37℃ 20分鐘,加終止液⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值。
豚鼠谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶μ2(GSTμ2/GSTm2)ELISA試劑盒
操作注意事項(xiàng)
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
試劑的
洗板
2. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
5. 棄去,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
繪制曲線:在Excel工作表中,以品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。
用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
試劑盒性能
2. 靈敏度檢測濃度小于1.0 mg/mL。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
6. 有效期:6個(gè)月
免責(zé)聲明
2. 嚴(yán)格按照說明書操作,實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
關(guān)鍵詞:ELISA試劑盒 靈敏度高 特異性強(qiáng) 重復(fù)性好
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