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標(biāo)題怎么知道您的細(xì)胞正遭受支原體摧殘呢

   

提供者:上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司    發(fā)布時(shí)間:2019/8/22   閱讀次數(shù):430次 >>進(jìn)入該公司展臺

培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),
發(fā)現(xiàn)細(xì)胞增殖變慢、
形態(tài)漸漸改變,
是血清或培養(yǎng)基的問題嗎?
很有可能是你的細(xì)胞污染了~~~~~

 

支原體污染
細(xì)胞污染可分為細(xì)菌、霉菌、酵母菌、支原體污染,其中支原體污染發(fā)生的概率>50%。支原體(Mycoplasma) 是最小的原核生物,約0.1-0.3μm,可穿透0.22-0.45 μm 過濾膜 (BI血清經(jīng)過3次0.1μm濾膜并且檢測支原體)。
支原體污染棘手的原因之一是沒有如其他污染源“立即可辨”的現(xiàn)象,支原體污染侵襲細(xì)胞但是并不一定致死。如果您的細(xì)胞出現(xiàn)如下狀態(tài):增殖變慢、形態(tài)變差、培養(yǎng)液變黃但是沒有渾濁,說明您的細(xì)胞可能正遭受支原體的摧殘!!


受支原體污染的293T              正常無污染的293T

 
支原體檢測
怎么知道您的細(xì)胞正遭受支原體摧殘呢,常見的檢測方法幾種:

1.分離培養(yǎng)法
將可疑樣本接種到支原體培養(yǎng)基中,觀察菌落生成。缺點(diǎn):培養(yǎng)時(shí)間長,須3~5周才能判斷。

2.DNA熒光染色法
利用熒光染劑 (Bisbenzimide, Hoechst 33258) 檢測支原體污染,但若有些細(xì)胞易有熒光背景,可能會干擾結(jié)果判讀。

3.PCR法
利用特異性引物,經(jīng)PCR反應(yīng)檢測支原體DNA,靈敏且快速。
BI EZ-PCR支原體檢測試劑盒:采用PCR法,簡化了細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的檢測過程,可檢測出細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見的支原體污染。

試劑盒中包含獨(dú)特的反應(yīng)混合液,以及PCR中需要的所有試劑。使用者只需備有樣品,最后產(chǎn)物跑完膠后,如有一個(gè)270bp的片段,則代表有支原體污染,整個(gè)檢測過程耗時(shí)約4小時(shí)。

關(guān)鍵詞:支原體檢測  支原體污染    

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