抗體是生物學(xué)科研工作中有力的東西，沒有之一。這些“制導(dǎo)武器”，會在研究中自動尋覓并結(jié)合研究者感興趣的目標(biāo)，并可經(jīng)過各種示蹤技能將目標(biāo)展現(xiàn)出來。正是因?yàn)榭贵w的專一特性，研究者或許會依賴于示蹤試驗(yàn)所顯示的成果對所研靶標(biāo)給出定性或定量的判斷。也正因此，毫無疑問的，專一性或特異性是抗體zui受科研工作者重視的特性。那么，抗體特異性首要由什么決定？為什么常聽到多抗特異性不如單抗的說法？在試驗(yàn)中，是該挑選單抗仍是多抗？

 

下面咱們將就抗體的生產(chǎn)制備進(jìn)程剖析抗體特異性差異的原因。

 

咱們不“生產(chǎn)”抗體，咱們只是大自然的“挑選”工抗體的制備，無論是單抗仍是多抗，其前期的動物免疫進(jìn)程是完全相同的，差異僅僅在挑選。或者說，單抗是在多抗制備的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步挑選并安穩(wěn)表達(dá)特異單克隆細(xì)胞株的成果。當(dāng)抗原免疫動物后，在淋巴結(jié)和脾等淋巴器官內(nèi)經(jīng)過一系列抗原處理和遞呈，促進(jìn)B淋巴漿母細(xì)胞（Plasmablasts, PBs）分解老練，在轉(zhuǎn)錄水平成為排泄特異抗體的B淋巴漿細(xì)胞（Plasma cells, PCs），很多不同的漿細(xì)胞會排泄不同的針對抗原的抗體。由此，可以說每一個B漿細(xì)胞都成為一株單克隆抗體的候選者。

 

傳統(tǒng)的單克隆抗體制備便是經(jīng)過將小鼠脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞系交融，挑選可以排泄特異抗體并安穩(wěn)傳代的交融細(xì)胞株而實(shí)現(xiàn)的。而多克隆抗體（多抗）的制備便是從血清中分離純化一切的未經(jīng)挑選的單克隆抗體。從以上進(jìn)程可以看出，無論是單抗仍是多抗制備辦法，其針對靶點(diǎn)（抗原）的特異性抗體的發(fā)作首要源于被免疫動物本身的漿細(xì)胞分解老練，抗體生產(chǎn)者（人）其實(shí)并沒有做什么。

 

不同在于，多克隆抗體猶如許多單克隆抗體的調(diào)集，它們有的特異性高，有的特異性低，總體特異性符合正態(tài)分布曲線的方式（如Fig1），而其特異性的總體表現(xiàn)也應(yīng)處于統(tǒng)計(jì)學(xué)正態(tài)曲線中位線（MID）的水平。而單抗制備后續(xù)的挑選進(jìn)程，可去除大部分的非特異抗體，保存幾株特異性較好的單克隆抗體。

 

 

然而，單抗制備進(jìn)程中的細(xì)胞交融是一個隨機(jī)發(fā)作的進(jìn)程，動物脾臟內(nèi)的各種細(xì)胞如內(nèi)皮、平滑肌、巨噬、NK、T、還有紅細(xì)胞、血小板等都或許與骨髓瘤細(xì)胞系發(fā)作交融。盡管B細(xì)胞是脾臟內(nèi)首要的淋巴細(xì)胞，但可以排泄特異性抗體的老練漿細(xì)胞占脾細(xì)胞的比例很低，加之促細(xì)胞交融試劑如PEG等的細(xì)胞毒性，使得終成功交融形成安穩(wěn)表達(dá)特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞系的功率極低，大約為10-6。因此，在單抗制備進(jìn)程中，大部分排泄特異性抗體的B細(xì)胞或許都被丟失了。終獲得的單克隆抗體其親和力和特異性或許都不是本次免疫中zui好的。