微生物培育基是供微生物成長、繁衍、代謝的混合養(yǎng)料。因?yàn)槲⑸�物具有不同的養(yǎng)分類型，對(duì)養(yǎng)分物質(zhì)的要求也各不相同，加之研究的意圖不同，所以培育基的種類許多，運(yùn)用的質(zhì)料也各有差異，但從養(yǎng)分視點(diǎn)剖析，微生物培育基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、無機(jī)鹽、成長素以及水分等。別的，培育基還應(yīng)具有適合的 pH 值、必定的緩沖才能、必定的氧化還原電位及適宜的滲透壓。為了到達(dá)特定要求的研究，需求進(jìn)行培育基制造和滅菌，那么微生物培育基該怎么制造與滅菌呢?

1. 調(diào)理 pH 值
用 pH 試紙 (或 pH 電位計(jì)、氫離子濃度比色計(jì)) 測驗(yàn)培育基的 pH 值, 如不契合需求, 可用 10%HCl 或 10%NaOH 進(jìn)行調(diào)理, 直到調(diào)理到配方要求的 pH 值停止。

2. 分裝
已過濾的培育基應(yīng)進(jìn)行分裝. 如果要制造斜面培育基, 須將培育基分裝于試管中. 如果要制造平板培育基或液體、半固體培育基, 則須將培育基分裝于錐形瓶內(nèi)。

3. 過濾
用濾紙、紗布或棉花趁熱將已配好的培育基過濾. 用紗布過濾時(shí), zui好折疊成六層, 用濾紙過濾時(shí), 可將濾紙折疊成瓦棱形, 鋪在漏斗上過濾。

4. 制造溶液
向容器內(nèi)參加所需水量的一部分, 按照培育基的配方, 稱取各種質(zhì)料, 順次參加使其溶解, zui終補(bǔ)足所需水分，對(duì)蛋白胨、肉膏等物質(zhì), 需加熱溶解, 加熱進(jìn)程所蒸騰的水分, 應(yīng)在悉數(shù)質(zhì)料溶解后加水補(bǔ)足。
制造固體培育基時(shí), 先將上述已配好的液體培育基煮沸, 再將稱好的瓊脂參加, 持續(xù)加熱至徹底消融. 并不斷攪拌, 防止瓊脂糊底燒焦。
分裝時(shí), 一手捏松繃簧夾, 使培育基流出, 另一只手抓住幾支試管或錐形瓶, 順次接取培育基。分裝時(shí), 注意不要使培育基粘附管口或瓶口, 防止浸濕棉塞引起雜菌污染。
裝入試管的培育基量, 視試管和錐形瓶的巨細(xì)及需求而定. 一般制造斜面培育基時(shí), 每只 15×150 毫米的試管, 約裝 3～4 毫升 (1/4～1/3 試管高度), 如制造深層培育基, 每只 20×220 毫米的試管約裝 12～15 毫升。每只錐形瓶裝入的培育基, 一般以其容積的一半為宜。

5. 制造斜面培育基和平板培育基
培育基滅菌后, 如制造斜面培育基和平板培育基, 須趁培育基未凝結(jié)時(shí)進(jìn)行。
(1) 制造斜面培育基。在試驗(yàn)臺(tái)上放 1 支長 0.5～1 米左右的木條, 厚度為 1 厘米左右，將試管頭部枕在木條上, 使管內(nèi)培育基天然歪斜, 凝結(jié)后即成斜面培育基。
(2) 制造平板培育基。將剛剛滅過菌的盛有培育基的錐形瓶和培育皿放在試驗(yàn)臺(tái)上, 點(diǎn)燃酒精燈, 右手托起錐形瓶瓶底, 左手拔下棉塞, 將瓶口在酒精燈上稍加灼燒, 左手翻開培育皿蓋, 右手敏捷將培育基倒入培育皿中, 每皿約倒入 10 毫升, 以鋪滿皿底為度. 鋪放培育基后放置 15 分鐘左右, 待培育基凝結(jié)后, 再 5 個(gè)培育皿一疊, 倒置過來, 平放在恒溫箱里,24 小時(shí)后查看, 如培育基末長雜菌，即可用來培育微生物。

6. 加棉塞
分裝結(jié)束后, 需求用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的首要意圖是過濾空氣, 防止污染. 棉塞應(yīng)選用普通新鮮、干燥的棉花制造, 不要用脫脂棉, 防止因脫脂棉吸水使棉塞無法運(yùn)用。制造棉塞時(shí), 要根據(jù)棉塞巨細(xì)將棉花鋪展成恰當(dāng)厚度, 揪取手掌心巨細(xì)一塊, 鋪在左手拇指與食指圈成的圓孔中, 用右手食指插入棉花中部, 一起左手食指與姆指稍稍緊握, 就會(huì)形成 1 個(gè)長棒形的棉塞. 棉塞作成后, 應(yīng)敏捷塞入管口或瓶口中, 棉塞應(yīng)緊貼內(nèi)壁不留縫隙, 以防空氣中微生物沿皺折侵入。棉塞不要過緊過松, 塞好后, 以手提棉塞、管、瓶不下落為適宜。棉塞的 2/3 應(yīng)在管內(nèi)或瓶內(nèi), 上端露出少量棉花便于拔取。塞好棉塞的試管和錐形瓶應(yīng)蓋上厚紙用繩捆札, 準(zhǔn)備滅菌。