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培養(yǎng)基,是指供給微生物、植物或動物(或組織)生長繁殖的,由不同營養(yǎng)物質組合配制而成的營養(yǎng)基質。一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等幾大類物質。培養(yǎng)基既是提供細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎物質,也是細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基種類很多,根據(jù)配制原料的來源可分為自然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基;根據(jù)物理狀態(tài)可分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基;根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等;根據(jù)使用范圍可分為細菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、真菌培養(yǎng)基等。培養(yǎng)基配成后一般需測試并調節(jié)pH,還須進行滅菌,通常有高溫滅菌和過濾滅菌。培養(yǎng)基由于富含營養(yǎng)物質,易被污染或變質。配好后不宜久置,最好現(xiàn)配現(xiàn)用。
影響培養(yǎng)基滅菌效果的六大因素
1. 營養(yǎng)成分的保持
濕熱滅菌時,微生物被殺死的同時,培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分也遭到了一定的破壞,特別是氨基酸和維生素。如在121℃,僅20min,就有59%的賴氨酸和精氨酸及其他堿性氨基酸被破壞,蛋氨酸和色氨酸也有相當數(shù)量被破壞。在熱的作用下某些營養(yǎng)成分還可能因受熱而相互之間發(fā)生反應,造成培養(yǎng)基中原有營養(yǎng)成分的數(shù)量變化,因而影響培養(yǎng)基質量。
2. 微生物的耐熱性
細菌芽孢的熱阻較大,滅菌所需要的時間取決于把細菌芽孢減少到所規(guī)定數(shù)目的時間。
3. pH值
對微生物的耐熱性影響很大。pH值介于6.0~8.0時,微生物最不易死亡。pH<6.0時,微生物比較容易死亡,此時H+很容易滲入微生物的細胞,從而改變細胞的生理反應,促使其死亡。所以培養(yǎng)基的pH越低,所需的時間也越短。
4. 培養(yǎng)基成分
油脂、糖類及蛋白質等組成的高濃度有機物會包于細胞的周圍形式一層薄膜、影響熱的傳導。而高濃度的鹽類、色素則削弱其耐熱性,滅菌較易。例如:大腸桿菌在水中加熱至60-65℃便死亡,在10%糖液中需70℃加熱4-6分鐘才死亡,在30%糖液中需30分鐘才死亡。
5. 泡沫
泡沫中的空氣形成隔熱層,使熱量難以滲透進去,殺死其中的雜菌。
6. 顆粒
顆粒小,容易滅菌,顆粒大,則難滅菌。對于含有少量較大顆粒及粗纖維的培養(yǎng)基,可用粗濾的方法(不應影響培養(yǎng)基質量)予以除去,培養(yǎng)基結塊會造成培養(yǎng)基滅菌的不徹底。
關鍵詞:培養(yǎng)基
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