基因組DNA提取方法

        制備基因組DNA是進(jìn)行基因結(jié)構(gòu)和功能研究的重要步驟，通常要求得到的片段的長(zhǎng)度不小于100-200kb。在DNA提取過(guò)程中應(yīng)盡量避免使DNA斷裂和降解的各種因素，以保證DNA的完整性，為后續(xù)的實(shí)驗(yàn)打下基礎(chǔ)。主要是CTAB方法，其他的方法還有1物理方式:玻璃珠法,超聲波法,研磨法,凍融法。2化學(xué)方式：異硫氰酸胍法,堿裂解法3生物方式:酶法。根據(jù)核酸分離純化方式的不同有:硅質(zhì)材料、陰離子交換樹(shù)脂等


試驗(yàn)步驟：

1、貼壁細(xì)胞用胰酶消化，離心收集。

2、細(xì)胞重懸于冰冷的PBS漂洗一次，離心收集。試驗(yàn)步驟2再重新作一邊。

3、加入5mlDNA提取緩沖液，（10mmol/LTris-cl,0.1mol/LEDTA,o.5%SDS）,混勻。

4、加入25ul蛋白酶K,使終濃度達(dá)到100ug/ml,混勻，50℃水浴3h,

5、用等體積的酚抽提一次，2500rpm離心收集水相，用等體積的（酚，氯仿，異戊醇）混合物抽提一次，2500r/min離心收集水相

6、用等體積的氯仿，異戊醇抽提一次。加入等體積的5mol/L的LiCL,混勻，冰浴，10min.。

7、2500rpm離心10min.轉(zhuǎn)上清于一離心管中。加入等體積的異丙醇。室溫10min。

2500rpm,離心10min。棄上清。

8、加入0.1倍體積3mol/L乙酸鈉（PH5.2）與2倍體積-20℃預(yù)冷無(wú)水乙醇。-20℃20min。

9、12000r/min,室溫離心5min。棄上清。將DNA溶于適量TE中。



 

公司主要代理產(chǎn)品：

 

試劑盒：ELISA試劑盒、檢測(cè)試劑盒、免疫組化試劑盒、放免試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒、金標(biāo)檢測(cè)試劑盒、Omega試劑盒、細(xì)胞凋亡試劑盒、生化試劑盒。

 

各種動(dòng)物血清：內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用血清、Hyclone、GIBCO胎牛血清。

 

抗體：進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、單標(biāo)抗體、雙標(biāo)抗體、多標(biāo)抗體、一抗、二抗；免疫組化抗體、免疫熒光抗體、流式細(xì)胞抗體、免疫細(xì)胞化學(xué)抗體。

 

細(xì)胞：原裝進(jìn)口細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、腫瘤耐藥細(xì)胞。

 

耗材：細(xì)胞培養(yǎng)耗材、普通實(shí)驗(yàn)耗材。

 

生化試劑：原裝進(jìn)口生化試劑、進(jìn)口分裝生化試劑。