欧美三级欧美成人高清,麻豆网神马久久人鬼片,男同gay自慰网站,欧美日韩精品一区二区三区激情,在线,男人的天堂av

請登錄 免費注冊

熱搜：通用機(jī)械五金工具儀器儀表安防監(jiān)控

頻道
通用機(jī)械 電子元器件 行業(yè)設(shè)備 五金工具 電工電氣 儀器儀表 安防監(jiān)控 專用汽車 照明燈具 化工原料 涂料 塑膠 建筑原料 皮革 冶金
猜您喜歡
推薦閱讀

您的位置：首頁 > 技術(shù)文獻(xiàn) > 產(chǎn)品說明 > 小技巧:ELISA 高背景的原因分析

標(biāo)題小技巧:ELISA 高背景的原因分析

   

提供者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司    發(fā)布時間：2018/9/5   閱讀次數(shù)：300次 >>進(jìn)入該公司展臺
ELISA 實驗過程中常常出現(xiàn)讓人難以琢磨的結(jié)果。其中陰性對照出現(xiàn)高背景的情況也時有發(fā)生，這樣導(dǎo)致結(jié)果不那么可信。出現(xiàn)高背景的原因可能如下。

1. 抗體、抗體的濃度不合適
抗體質(zhì)量不好，特異性不高可能會與封閉液（BSA）產(chǎn)生交叉反應(yīng)，可以用 0.8% 的明膠代替，本底就很好了。
抗體親和力不好，也會如此，由于加大了抗體的使用量，必然造成了非特異性增加的可能。

2. 封閉液成分、封閉液的濃度、封閉時間
封閉液，如 BSA 可能與抗體發(fā)生交叉反應(yīng)，導(dǎo)致背景偏高。
封閉液的濃度偏低，封閉時間過短，導(dǎo)致封閉不徹底，抗體與酶標(biāo)板孔結(jié)合，也可能導(dǎo)致背景偏高。

3. 孵育時間、孵育溫度
孵育時間過長 、溫度過高，也可能會導(dǎo)致非特異性結(jié)合增加，從而造成本底增高。

4. 洗板液成分、洗板的時間
一般用 PBS 洗板就可以了，但有時候可以在洗板液中加入一些表面活性劑，如 tween-20。
洗板的時間不足，會導(dǎo)致抗體殘留，引起陰性對照顯色。如果是機(jī)洗，可以改為手洗少量嘗試，增加洗板時間。機(jī)洗一般沒有手洗去除干凈。

5. 顯色時間
由于系統(tǒng)優(yōu)化不好，導(dǎo)致樣品顯色較弱，而延長了顯色時間，這樣一來導(dǎo)致陰性對照也有部分顯色。此時，應(yīng)該優(yōu)化檢測系統(tǒng)，調(diào)整包被物、檢測抗體、底物等的濃度，縮短顯色時間，顯色一般不超過 15 min。

6. 樣品
樣品中含有干擾物質(zhì)。此時可以優(yōu)化系統(tǒng)，調(diào)整其他檢測抗體的比例，而增加樣品的稀釋度、增加洗脫步驟等。

7. ELISA 板的選擇
聚苯乙烯制備的 ELISA 板經(jīng)射線照射后，其吸附性能特別是對免疫球蛋白的吸附性能增加，應(yīng)用于雙抗體夾心法可使固相上抗體量增多，但用于間接法測抗體時空白值較大。
與聚苯乙烯類似的塑料是聚氯乙烯。作為 ELISA 固相載體的一種，聚氯乙烯的特點為質(zhì)軟板薄，可剪割，價廉，但光潔度不如聚苯乙烯板，孔底亦不如聚苯乙烯平整。聚氯乙烯對蛋白質(zhì)的吸附性能比聚苯乙烯高，但空白值也略高。

關(guān)鍵詞：ELISA  實驗  ELISA試劑盒    

版權(quán)聲明

① 凡本網(wǎng)注明"來源：易推廣"的所有作品，版權(quán)均屬于易推廣，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用。已獲本網(wǎng)授權(quán)的作品，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)

使用，并注明"來源：易推廣"。違者本網(wǎng)將追究相關(guān)法律責(zé)任。

② 本信息由注冊會員：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司 發(fā)布并且負(fù)責(zé)版權(quán)等法律責(zé)任。

最新產(chǎn)品 - 今日最熱門報道-分類瀏覽 - 每日產(chǎn)品

  • 易推廣客服微信