誤區(qū)一：重復(fù)使用含 DEPC 的水處理槍頭、離心管等。

 

由于 DEPC 較貴，而且書上說(shuō) DEPC 要用高壓滅菌處理去除，于是有些人就萌發(fā)了重復(fù)使用 DEPC 的想法，即對(duì)含有 DEPC 的水不進(jìn)行高壓滅菌，從而重復(fù)使用含 DEPC 的水處理槍頭、離心管等。

 

節(jié)約本是好事，但這樣的節(jié)約是無(wú)效的。為什么不能重復(fù)使用含 DEPC 的水？因?yàn)?DEPC 在水溶液中不穩(wěn)定，極易分解，DEPC 在 pH 6.0 和 pH 7.0 的 PBS 緩沖液中的半衰期分別約為 20 min 和 10 min，DEPC 在水中的半衰期約為 30 min。因此，重復(fù)使用含 DEPC 的水就不能保證槍頭和離心管的 RNase-free。

 

誤區(qū)二：必需長(zhǎng)時(shí)間高壓滅菌來(lái)徹底去除 DEPC。

 

用 DEPC 處理過(guò)的溶液，在 15－20 min 的高壓滅菌后還可以聞到一股特殊的香味，因此有人認(rèn)為高壓滅菌去除 DEPC 不徹底，所以要延長(zhǎng)高壓滅菌的時(shí)間以完全去除 DEPC。

 

但是延長(zhǎng)高壓滅菌的時(shí)間并不需要，因?yàn)槁劦降奶厥庀阄恫皇?DEPC 的，而是 DEPC 分解產(chǎn)物之一的乙醇同溶液中殘留的微量的羧酸（如甲酸和乙酸等）反應(yīng)產(chǎn)生的揮發(fā)性脂類。這種特殊的水果香味不代表有痕量的 DEPC 殘留。

 

誤區(qū)三：溶液中 DEPC 含量約高，滅活 RNase 的效果越好。

 

這個(gè)誤區(qū)錯(cuò)了一半，的確，1% DEPC 能滅活高達(dá) 1000 ng/ml 的 RNase A，而 0.1% DEPC 只能滅活少于 500 ng/ml 的 RNase A。但是溶液中殘留的 DEPC 副產(chǎn)物會(huì)抑制一些酶反應(yīng)，例如 DEPC 副產(chǎn)物會(huì)抑制體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，因此 DEPC 含量越高，高壓滅菌后的 DEPC 副產(chǎn)物就越多，抑制越明顯。