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標(biāo)題UH系列超聲波細(xì)胞粉碎儀說(shuō)明書(shū)(二)

   

提供者:天津奧特賽恩斯儀器有限公司    發(fā)布時(shí)間:2009/7/6   閱讀次數(shù):546次 >>進(jìn)入該公司展臺(tái)

六、后面板示意

1.聚能頭連接插座

2.腳踏開(kāi)關(guān)連接插座

3.9D形接口

其中:

針號(hào)       說(shuō)明

1             保護(hù)信號(hào)輸入(低電平脈沖有效)

2             保護(hù)狀態(tài)解除(低電平脈沖有效)

3             空腳

4             可連接至頻率計(jì)數(shù)器

5             可連接至外部功率表(10毫伏輸出=1瓦特)

6             地線

7             此腳接地時(shí)為超聲波振蕩提供電路

89 在此兩個(gè)針腳接10K電位器可以遙控調(diào)節(jié)超聲波振蕩強(qiáng)度

4.電源插座

5.風(fēng)扇罩

注意:當(dāng)外接腳踏開(kāi)關(guān)的電纜插頭插入后面板連接插座后,腳踏開(kāi)關(guān)的通斷即與面板控制按鍵同時(shí)對(duì)粉碎儀的輸出進(jìn)行控制:欲使粉碎儀工作時(shí),必須先以面板控制按鍵將設(shè)備調(diào)至需要的設(shè)置(定時(shí)長(zhǎng)度、工作方式占空比)和有輸出狀態(tài)(“start/stop”指示燈亮)再踩壓腳踏開(kāi)關(guān),設(shè)備才有超聲輸出。若不需要腳踏控制,則必須將腳踏開(kāi)關(guān)插頭由后面板的插座中拔出。

七、使用前的準(zhǔn)備工作

注意:如果把超聲波細(xì)胞粉碎儀長(zhǎng)時(shí)間放在極冷或極熱的環(huán)境中,要等它達(dá)到室溫后才能進(jìn)行操作。

1.  確認(rèn)電源控制鈕置于OFF狀態(tài)。

2.  把電源線插進(jìn)電源插座。

3.  如換能用其它的變幅桿,請(qǐng)用隨機(jī)附帶的搬手和橡膠皮將聚能頭前的“Tip”頭擰下后再將所需的變幅桿擰緊到聚能頭上。

注意:不得把轉(zhuǎn)換器夾在臺(tái)鉗上裝配或者拆卸探頭。

4.  把轉(zhuǎn)換器、探頭組件安裝在實(shí)驗(yàn)室支架上,或是筒形消音罩中。

5.  把換能器電纜連接到電源連接單元上。

6.  如果使用選配件腳踏開(kāi)關(guān),把腳踏開(kāi)關(guān)插頭插進(jìn)后面板的插座中,并確認(rèn)插頭完全插進(jìn)了插座。

圖三鈦合金聚能桿及變幅桿

八、操作建議和技術(shù)

破碎細(xì)胞

單細(xì)胞有機(jī)體(微生物)含有半透性堅(jiān)韌的細(xì)胞外壁,包圍原漿(細(xì)胞)膜和細(xì)胞質(zhì)。細(xì)胞質(zhì)由核酸、蛋白、碳水化合物、脂質(zhì)、酶、有機(jī)離子、維生素、色素、包涵體,以及80%的水組成。要從細(xì)胞內(nèi)分離和提取任何這些成分,必須破碎細(xì)胞壁和原漿膜。有時(shí)細(xì)胞可以分泌出所需要的物質(zhì),但是在多數(shù)情況下,必須用超聲波破碎細(xì)胞壁才可以放出這些物質(zhì)。

 

     微生物對(duì)超聲波分解的靈敏度差別較大。例如,最容易分解的是桿狀微生物(桿菌),而球形微生物(球菌)要難于分解得多。分枝桿菌屬特別難于破碎的菌種,結(jié)核菌就是其中一種。一般地說(shuō),動(dòng)物細(xì)胞比植物細(xì)胞易于破碎,紅血球比肌細(xì)胞要易于破碎得多,因?yàn)榧t細(xì)胞沒(méi)有堅(jiān)硬的細(xì)胞壁。在進(jìn)行超聲波處理時(shí),樣品中的分子運(yùn)動(dòng)一般會(huì)引起溫度上升,特別是在容積較小的情況下溫度上升更快。因?yàn)楦邷赜绊懣栈M(jìn)程的進(jìn)行,所以應(yīng)當(dāng)盡可能保持樣品在低溫下處理,最好是在接近冰點(diǎn)的溫度下進(jìn)行破碎,比如可以通過(guò)把樣品浸入在冰鹽水浴中進(jìn)行破碎,還可通過(guò)使用脈沖超聲波處理,也就是說(shuō)主樣品承受幾個(gè)瞬時(shí)的超聲波簇,從而減緩溫度的上升。

 

還可以通過(guò)增加液壓(一般來(lái)說(shuō)15~60psi)和增加粘度的方法促進(jìn)細(xì)胞破碎。處理微生物時(shí),加入0.050.5毫米直徑的玻璃珠,由于集中空化釋放的能量和物理碾壓作用,可以促進(jìn)細(xì)胞破碎。在破碎孢子和酵母菌時(shí),玻璃珠幾乎是不可缺少的。推薦的比例是一個(gè)體積玻璃珠,兩個(gè)體積液體。

 

在處理難破碎的細(xì)胞時(shí)用溶菌酶之類(lèi)的酶進(jìn)行預(yù)處理比較好,比如用蝸牛酶預(yù)處理酵母、溶葡球菌酶預(yù)處理葡萄球菌、膠原蛋白酶預(yù)處理皮膚和軟骨,透明酯酸胰蛋白酶預(yù)處理肝和腎。

 

如果不能夠使用酶,可以考慮以下的處理過(guò)程:在-70把樣品冷凍過(guò)夜,在進(jìn)行超聲波破碎前溶成冰水;應(yīng)當(dāng)盡可能把組織切得非常細(xì)小使之能夠在水中移動(dòng);皮膚及肌肉之類(lèi)的堅(jiān)韌組織應(yīng)當(dāng)先用攪切機(jī)之類(lèi)的儀器均漿處理10秒鐘,并且在超聲波處理時(shí)封閉裝在小容器中,如果對(duì)實(shí)驗(yàn)沒(méi)有影響,也可以采用冷凍后再磨碎的方法;如果希望不破壞亞細(xì)胞顆粒,應(yīng)當(dāng)把震幅設(shè)置得較低,而處理時(shí)間作相應(yīng)的延長(zhǎng)。

 

降低氣溶現(xiàn)象

把探頭插至樣品表面以下足夠深處,以抑制氣溶現(xiàn)象或者發(fā)泡現(xiàn)象。發(fā)泡可能會(huì)嚴(yán)重地降低空化作用并且可造成蛋白質(zhì)變性。在低功率下對(duì)樣品進(jìn)行處理、沒(méi)有起泡現(xiàn)象發(fā)生,其效果比在高功率下處理、有起泡現(xiàn)象好得多。降低功率、延長(zhǎng)時(shí)間,使用較小的容器以及降低液體的溫度一般可以防止氣溶現(xiàn)象和發(fā)泡現(xiàn)象。不要使用抗泡沫劑或者表面活性劑。

 

在空化時(shí)會(huì)形成自由基。如果任其積累,自由基會(huì)與蛋白質(zhì)、多糖及核酸反應(yīng)而破壞樣品中的成分。盡管在較短的處理時(shí)間下自由基的形成一般對(duì)樣品不會(huì)造成很大影響,但如果準(zhǔn)備長(zhǎng)時(shí)間對(duì)樣品進(jìn)行處理,添加某些自由基清除物,諸如N20、半胱氨酸、還原氨酸、還原谷胱甘肽、二硫蘇糖醇或者其它SH之類(lèi)的化合物,是有益的。用氦氣及氫氣之類(lèi)的氣體進(jìn)行保護(hù)或者在樣品中投入小塊干冰一般會(huì)抑制自由基的形成。

 

容器的選擇

因?yàn)槟芰酷尫琶芏茸畲蟮那闆r剛好發(fā)生在探頭下面,所以應(yīng)當(dāng)把樣品盡可能地靠近端頭。自由運(yùn)動(dòng)的細(xì)胞反復(fù)地在探頭下面循環(huán),以達(dá)到最好的處理效果。由于固體易于被超聲波排開(kāi),破碎固體顆粒時(shí),應(yīng)當(dāng)把探頭放在與其直徑相適應(yīng)的容器中,較小的容器可以限制固體顆粒的移動(dòng)。處理小體積的樣品推薦使用圓錐形試管。盡管塑料試管可以使用,但是不銹鋼試管比塑料試管更加有效,因?yàn)樗鼈儾晃照駝?dòng)能量。

 

如果探頭與容器接觸會(huì)使輸出功率損失,并使細(xì)微的玻璃粒進(jìn)入液體中。雖然這些玻璃粒不會(huì)對(duì)樣品的化學(xué)成分產(chǎn)生影響,但是在離心時(shí)會(huì)形成薄薄的灰色雜質(zhì)層。如果探頭必須與固體樣品接觸,請(qǐng)使用不銹鋼試管。微型Tip只能與液體接觸,不得與其它物體接觸,因?yàn)樵诮佑|點(diǎn)產(chǎn)生的應(yīng)力會(huì)引起微型Tip破裂。雖然直徑較大的探頭與容器接觸時(shí)不會(huì)破裂,但是會(huì)造成容器破裂。

 

在每次使用前,把探頭或微型Tip放在水(或者酒精)中,接通電源數(shù)秒,以去除殘余物。

 

預(yù)防粘連現(xiàn)象

為防止粘連現(xiàn)象發(fā)生,可采用硅處理方法處理試管:徹底清洗和干燥試管,涂復(fù)硅酮,然后風(fēng)干。探頭或變幅桿可以浸入開(kāi)水中消毒,或用滅菌劑消毒。

 

高粘度和高濃度的溶液進(jìn)行破碎會(huì)比較困難。5,000CPS15%的濃度一般為破碎極限。如果樣品濃稠得不易傾倒或者不易流動(dòng),就不適于用超聲波處理。

九、設(shè)備返修

我們建儀把需要修理的超聲波細(xì)胞粉碎儀送回原廠。為了得到及時(shí)的服務(wù),請(qǐng)?jiān)谒突貎x器前與工廠聯(lián)系。信中請(qǐng)注明購(gòu)買(mǎi)日期、型號(hào)和系列號(hào)。保修之外的機(jī)器,應(yīng)當(dāng)提交定單以免不必要的延誤。仔細(xì)包裝以免運(yùn)輸途中損壞。

 

 

關(guān)鍵詞:超聲波  均質(zhì)儀    粉碎儀  

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