在免疫沉淀試驗后的WB驗證環(huán)節(jié)中,二抗的選擇往往可以避免經(jīng)常出現(xiàn)的重鏈輕鏈的干擾原因,當(dāng)使用常規(guī)的Anti-lgG(H+L)酶標(biāo)二抗時,通常會出現(xiàn)對應(yīng)免疫沉淀一看的重鏈(55kDa)和輕鏈(30kDa)的兩條帶。如果檢測的目的蛋白分子量在55kDa或者30kDa附近時,就會收到這兩條帶的干擾。針對這種情況,艾美捷推薦兩種二抗解決方案:
一種是在IP和WB實驗中使用相同的抗體,可以通過蛋白質(zhì)分子量大小來進(jìn)行判斷,如果您的目標(biāo)蛋白分子量小于30Kda,為了避免抗體輕鏈的干擾,艾美捷推薦您使用重鏈特異性的二抗。下面推薦熱銷產(chǎn)品:
另一種是在IP和WB實驗中使用相同的抗體,如果您的目標(biāo)蛋白分子量大于30Kda,為了避免抗體重鏈的干擾,艾美捷推薦您使用輕鏈特異性的二抗。下面推薦熱銷產(chǎn)品:
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