標(biāo)本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性 HRP，也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。保存過久可發(fā)生聚合在 ELISA 中可使本底加深。凍結(jié)標(biāo)本融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，應(yīng)充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下顛倒混和，不要在混勻器上強烈振蕩�；鞚峄蛴谐恋淼臉�(biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測。

反復(fù)凍融會使蛋白效價降低，所以待測標(biāo)本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。也可加入適當(dāng)防腐劑。每個標(biāo)本量收集體積＝ 100ul × 檢測種類，如要做復(fù)孔，標(biāo)本量收集體積＝ 100ul × 檢測種類×2 。
對于作某一個具體指標(biāo)來說，最好先用一系列稀釋度作一批標(biāo)本測定，得出對實驗有意義的一個稀釋度（即測定劑量反應(yīng)曲線），然后用一個最適稀釋度測定即可。

收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天進行檢測的標(biāo)本，儲存在4 ℃ 備用，如有特殊原因需要周期收集標(biāo)本，將標(biāo)本及時分裝后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本 2 -8 ℃ 可保存 48 小時， -20 ℃ 可保存 1 個月。 -70 度
可保存 6 個月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶。

血清標(biāo)本采集時，應(yīng)注意避免溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，以 HRP 為標(biāo)記的 ELISA 測定中，溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。