標題古朵詳述細胞培養(yǎng)中的無菌技術

提供者：上海古朵生物科技有限公司發(fā)布時間：2016/10/28 閱讀次數(shù)：955次 >>進入該公司展臺

    詳述細胞培養(yǎng)中的無菌技術   上海古朵生物簡述：

    1.實驗進行前，無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作臺面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以70%ethanol擦拭無菌操作臺面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后，再進行下一個細胞株的操作。

    2.無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管、吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實驗用品用完即應移出，以利于氣流之流通。實驗用品以70%ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在臺面的中央無菌區(qū)域，勿在邊緣的非無菌區(qū)域操作。

    3.小心取用無菌的實驗物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或容器瓶口，亦不要在打開的容器正上方操作實驗。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約45°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。

    4.工作人員應注意自身的安全，須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。對于來自人類或是病毒感染的細胞株應特別小心操作，并選擇適當?shù)燃壍臒o菌操作臺(至少ClassII)。操作過程中，應避免引起aerosol的產(chǎn)生，小心毒性，例如DMSO及TPA等，并避免尖銳針頭的傷害等。

    5.定期檢測下列項目：

    5.1.CO2鋼瓶的CO2壓力

    5.2.CO2培養(yǎng)箱的CO2濃度、溫度、及水盤是否有污染(水盤的水用無菌水，每周更換)。

    5.3.無菌操作臺內(nèi)的airflow壓力，定期更換紫外線燈管及HEPA過濾膜，預濾網(wǎng)(300小時/預濾網(wǎng)，3000小時/HEPA)。

    6.水槽可添加消毒劑(Zephrin1:750)，定期更換水槽的水。

關鍵詞：細胞培養(yǎng)/培養(yǎng)基/科研實驗

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