本試劑盒是利用競爭ELISA方法,在酶標(biāo)板微孔上預(yù)包被抗磺胺二甲基嘧啶抗原。檢測時(shí),加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,磺胺二甲基嘧啶抗體及酶標(biāo)記物,包被抗原和加入樣本中的磺胺二甲基嘧啶競爭性地與磺胺二甲基嘧啶抗體結(jié)合后,再與酶標(biāo)記物形成抗原抗體復(fù)合物,用TMB底物顯色;加入反應(yīng)終止液,在450nm波長酶標(biāo)儀下進(jìn)行檢測,樣品中的磺胺二甲基嘧啶濃度與吸收光強(qiáng)度成反比。
磺胺噻唑處理,任何樣本時(shí),都須注意: (1)實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時(shí)要更換吸頭。(2)實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈,必須使用潔凈實(shí)驗(yàn)器具,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 樣本處理步驟:(A)組 織(雞、鴨、豬肌肉/肝臟、雞蛋、魚、蝦等) 取組織樣本用勻漿機(jī)10000r/min勻漿1 min。 2. 稱取3±0.05g勻漿物置離心管中,先加入3ml 0.02M PB充分振蕩混勻,再加入4ml乙酸乙酯和2ml乙腈,充分振蕩5min,于15℃,4000r/min以上速度離心10min; 3. 移取2ml上層液體(約相當(dāng)于1g的樣本)在50-60℃氮?dú)饣蚩諝獯蹈; ?. 加入1ml正己烷溶解干燥的殘留物,再加入1ml稀釋后的復(fù)溶液強(qiáng)烈振蕩混合30s,室溫4000r/min,離心5min,除去上層液; 5. 取20µl下層用于分析。
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