
您的位置:首頁 > 技術(shù)文獻(xiàn) > 技術(shù)交流 > Western Blot實驗所用到的基本試劑
1、 十二烷基硫酸鈉SDS溶液:10%(w/v)0.1gSDS,1mlH2O去離子水配制,室溫保存。
2、 丙烯酰胺和N,N’-亞甲雙丙烯酰胺,應(yīng)以溫?zé)?span lang="EN-US">(以利于溶解雙丙稀酰胺)的去離子水配制含有29%(w/v)丙稀酰胺和1%(w/v)N,N’-亞甲雙丙烯酰胺儲存液丙稀酰胺
3、 濃縮膠緩沖液:0.5mmol/LTris-HCL(pH6.8):6.05gTris溶于40mlH2O中,用約48ml 1mol/L HCL調(diào)至pH6.8加水稀釋到100ml終體積。過濾后
4、 分離膠緩沖液:1.5mmol/LTris-HCL(pH8.8):18.15gTris和48ml1mol/LHCL混合,加水稀釋到100ml終體積。過濾后
5、 SDS- PAGE加樣緩沖液:pH6.8 0.5mol/L Tris緩沖液8ml,甘油6.4ml,10%SDS 12.8ml,巰基乙醇3.2ml,0.05%溴酚藍(lán)1.6ml,H2O 32ml混勻備用。按1:1或1:2比例與蛋白質(zhì)樣品混合,在沸水終煮3min混勻后再上樣,一般為20-25ul,總蛋白量100μg。
6、 TEMED原溶液N,N,N’N’四甲基乙二胺催化過硫酸銨形成自由基而加速兩種丙稀酰胺的聚合。PH太低時,聚合反應(yīng)受到抑制。10%(w/v)過硫酸胺溶液。提供兩種丙稀酰胺聚合所必須的自由基。去離子水配制數(shù)ml,臨用前配制.
7、 轉(zhuǎn)移緩沖液:配制
8、 Tris-甘氨酸電泳緩沖液:30.3gTris,
9、 脫脂奶粉5%(w/v)。
10、 麗春紅染液儲存液:麗春紅S
11、 Tris緩沖鹽溶液(TBS):20mmol/LTris/HCL(pH7.5),500mmol/LnaCl。
12、 NaN3 0.02% 疊氮鈉(有毒,戴手套操作),溶于磷酸緩沖鹽溶液(PBS)。
13、 過氧化物酶標(biāo)記的第二抗體。
14、 Tween20(15)鼠抗人-MMP-9(16)鼠抗人-TIMP-1。
15、 BCIP(溶于100%二甲基甲酰胺,50mg/ml)。
16、 NBT(溶于70%二甲基甲酰胺,75mg/ml)。
17、 100mmol/L NaCl。
18、 100mmol/LTris-HCL(pH9.5)。
19、 50mmol/LTris-HCL(pH7.5),5mmol/L EDTA。
關(guān)鍵詞:
① 凡本網(wǎng)注明"來源:易推廣"的所有作品,版權(quán)均屬于易推廣,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用。已獲本網(wǎng)授權(quán)的作品,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)
使用,并注明"來源:易推廣"。違者本網(wǎng)將追究相關(guān)法律責(zé)任。② 本信息由注冊會員:上海宜騰生物科技有限公司 發(fā)布并且負(fù)責(zé)版權(quán)等法律責(zé)任。
易推廣客服微信