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實(shí)驗(yàn)原理:
在熒光蛋白(YFP、GFP、Luciferase等)的兩個(gè)β片層之間的環(huán)結(jié)構(gòu)上有許多特異性位點(diǎn)可以插入外源蛋白而不影響熒光蛋白的熒光活性。BiFC技術(shù)正是利用熒光蛋白家族的這一特亍性
依照某一蛋白質(zhì)的氨基酸序列,或基因序列,設(shè)計(jì)全長(zhǎng)引物,利用OVERLAP法形成模版DNA,再利用PCR擴(kuò)增的法得到雙鏈DN疋A,然后將PCR產(chǎn)物轉(zhuǎn)化克隆至克隆載體或者表達(dá)載體中。化學(xué)合成全基因目前是準(zhǔn)
Invitrogen核/膜系統(tǒng)
一、實(shí)驗(yàn)原理:
酵母雙雜交系統(tǒng)是在酵母體內(nèi)通過重建有活性轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)來鑒定蛋白質(zhì)之間的相互作用。轉(zhuǎn)錄因子可以和DNA上特異的序列結(jié)合而啟動(dòng)相應(yīng)基因的轉(zhuǎn)錄$
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