中文名：Tris-氯化銨紅細(xì)胞裂解液

供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕

產(chǎn)品規(guī)格：100ml

分類：細(xì)胞組分離

儲(chǔ)存方式：4℃,12個(gè)月

產(chǎn)品用途：Tris-NH4CL法溶解紅細(xì)胞,去除細(xì)胞懸液中的紅細(xì)胞

說明：無菌溶液，pH值為7.2，經(jīng)過濾除菌處理

Tris-氯化銨紅細(xì)胞裂解液說明

1.本品是一種從人，鼠或其他哺乳動(dòng)物等體內(nèi)的組織樣品或血液中裂解并去除無核紅細(xì)胞的溶！主要有效成分為氯化銨，本品經(jīng)過優(yōu)化配方后，在裂解無核紅細(xì)胞的同時(shí)幾乎不損傷淋巴細(xì)(lymphocyte)或其它有細(xì)胞核的細(xì)胞。

2.本品經(jīng)過濾除菌，經(jīng)過Tris-NH4ClLysisBuffer處理過的血液或組織細(xì)胞樣品可以用于后續(xù)的細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測(cè)。

公司介紹

遠(yuǎn)慕生物是家專業(yè)代理生產(chǎn)銷售為一體的優(yōu)質(zhì)科研試劑供應(yīng)商，已和國(guó)內(nèi)多所高校，醫(yī)院，事業(yè)單位，生物公司，科研院等達(dá)成了長(zhǎng)期合作關(guān)系 ，由我們?yōu)槠涮峁┎煌�系列的進(jìn)口試劑及國(guó)產(chǎn)試劑，包含有：ELISA試劑盒，培養(yǎng)基，抗體，氨基酸，細(xì)胞株，微生物，生物分子，生化試劑，生物試劑，染色液，緩沖液，溶液，實(shí)驗(yàn)耗材，動(dòng)物血清血漿，標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品，其他系列試劑等，品種齊全，價(jià)格實(shí)惠，我們還提供ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，歡迎來電咨詢，我們將竭誠(chéng)為您解答每一個(gè)問題！

Tris-氯化銨紅細(xì)胞裂解液操作步驟

1.制備細(xì)胞懸液：新鮮組織經(jīng)過胰蛋白酶或膠原酶等消化處理，通過適當(dāng)方法制備成細(xì)胞懸液，離心棄上清；

2.裂解：加入細(xì)胞5倍細(xì)胞沉淀體積的Tris-NH4Cl Lysis Buffer，輕柔吹打混勻，裂 解1～2min。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作；

3.加入15～20ml的 PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，輕柔混勻；

4.離心：4℃，400～500g離心5min，棄紅色上清，本步驟亦可在室溫下操作；

5.如果發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2～4各一次；

6.根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要用適當(dāng)溶液重懸細(xì)胞沉淀，進(jìn)行計(jì)數(shù)、培養(yǎng)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

Tris-氯化銨紅細(xì)胞裂解液配制方法 

1.10 g葡萄糖+0.6 g磷酸二氫鉀+3.58 g磷酸氫二鈉（7H2O）+20 ml 5 g/L酚紅溶液；加雙蒸水定容至1 000 ml。

2.1.86 g氯化鈣（2H2O）+4.0 g氯化鉀+80 g氯化鈉+1.04 g氯化鎂+2.0 g硫酸鎂（7H2O）；加雙蒸水定容至1 000 ml。

注：應(yīng)用液有3種

a，10 ml原液1號(hào)+10 ml原液2號(hào)，加雙蒸水定容至100 ml

b，20 ml原液1號(hào)+20 ml原液2號(hào)，加雙蒸水定容至100 ml

c，1ml原液1號(hào)+1 ml原液2號(hào)，加雙蒸水定容至100 ml

3.紅細(xì)胞裂解
取100 μl抗凝全血、加2 ml應(yīng)用液3#、混勻15～20 s、加2 ml應(yīng)用液2#、混勻15～20 s、加4 ml應(yīng)用液1#、混勻15～20 s、300×g離心2 min、棄上清、收集沉淀、加PBS緩沖液、制成白細(xì)胞懸液、備用。

4.紅細(xì)胞裂解液(0.01mol/L Tris-HCL pH7.6、0.01mol/L NaCl、0.005mol/L MgCl2)。

5.紅細(xì)胞裂解液（139.6 mmol/L NH4Cl、16.96 mmol/L Tris、用1 mol/L HCl調(diào) pH至7.2）。

6.紅細(xì)胞裂解液的制備：碳酸氫鉀（KHCO3）1.0g、氯化氨（NH4CL）8.3g、EDTA-Na2 0.037g、加雙蒸水至1000ml，即工作液。

Tris-氯化銨紅細(xì)胞裂解液配制方法注意事項(xiàng)

1.制備細(xì)胞懸液是應(yīng)根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)需要；不一定要制備成單細(xì)胞懸液。

2.后續(xù)試驗(yàn)如果是用于細(xì)胞培養(yǎng)；操作過程中應(yīng)注意無菌操作；盡量在超凈工作臺(tái)內(nèi)操作。

3.離心步驟盡量在4℃離心機(jī)上操作。

4.離心洗滌后；通常極微量的紅細(xì)胞不會(huì)影響后續(xù)的檢測(cè)。

5.如果經(jīng)過Tris-NH4Cl Lysis Buffer處理后的樣品后續(xù)用于總RNA的提��；在處理細(xì)胞時(shí)不必使用DEPC處理的溶液；即無需在該操作中特意去除RNase。

6.為了您的安全和健康；請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

7.在實(shí)際操作過程中；一定要按照說明書的要求進(jìn)行正確的操作。

標(biāo)簽：Tris-氯化銨紅細(xì)胞裂解液，氯化銨紅細(xì)胞裂解液，紅細(xì)胞裂解液