黃曲霉毒素是一類(lèi)真菌（如黃曲霉和寄生曲霉）的有毒的代謝產(chǎn)物，它們具有很強(qiáng)的致癌性，主要存在于谷物、堅(jiān)果、棉籽以及一些和人類(lèi)血液，動(dòng)物飼料相關(guān)的產(chǎn)品中。黃曲霉毒素M1是黃曲霉毒素B1的羥基化代謝產(chǎn)物，也是一種強(qiáng)致癌物質(zhì)。牛乳及其制品是易受到黃曲霉毒素M1污染的食品之一。Aflatoxin M1的檢測(cè)方法有高效液相色譜法(HPLC)，薄層層析法(TLC)等。而使用黃曲霉毒素M1 ELISA試劑盒則能夠快速而準(zhǔn)確的分析樣品中黃曲霉毒素M1殘留。 

二、適用范圍

黃曲霉毒素M1 ELISA試劑盒可定性、定量檢測(cè)牛奶，奶粉等樣本中的黃曲霉毒素M1。

三、試驗(yàn)原理

黃曲霉毒素M1 ELISA試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)ELISA，在微孔板上預(yù)包被黃曲霉毒素M1抗原，加入樣本（或黃曲霉毒素M1標(biāo)準(zhǔn)品溶液）及辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的黃曲霉毒素M1抗體。樣本或標(biāo)準(zhǔn)品溶液中的黃曲霉毒素M1與預(yù)包被在板孔上的黃曲霉毒素M1抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的黃曲霉毒素M1抗體。與樣本或標(biāo)準(zhǔn)品溶液中的黃曲霉毒素M1結(jié)合的酶標(biāo)抗體在洗滌時(shí)被除去。再加入TMB顯色液，讀取吸光值。樣本的吸光值與其所含殘留物黃曲霉毒素M1抗原的含量成負(fù)相關(guān)。對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線，即可得出相應(yīng)殘留物黃曲霉毒素M1的含量。

四、注意事項(xiàng)

1. 室溫低于20℃或試劑及樣本沒(méi)有回到室溫（20～25℃）會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。

2. 在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況，則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。

3. 每加一種試劑前需將其搖勻。

4. 反應(yīng)終止液為2M鹽酸，避免接觸皮膚。

5. 不要使用過(guò)了有效日期的試劑盒；也不要使用過(guò)了有效期的試劑盒中的任何試劑，摻雜使用過(guò)了有效期的試劑盒會(huì)引起靈敏度的降低；不要交換使用不同批號(hào)試劑盒中的試劑。

6. 儲(chǔ)存條件：

保存試劑盒于2～8℃，不要冷凍，將不用的酶標(biāo)板微孔板放進(jìn)自封袋重新密封。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無(wú)色的發(fā)色劑對(duì)光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。

7. 試劑變質(zhì)的跡象：

發(fā)色試劑有任何顏色表明發(fā)色劑變質(zhì)，應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A_450nm<0.5）時(shí)，表示試劑可能變質(zhì)。

8. 在加入底物液液后，一般顯色時(shí)間為20～30min即可。若顏色較淺，可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間到35min（或更長(zhǎng)），但不得超過(guò)40min。反之，則減短反應(yīng)時(shí)間。

9. 該試劑盒最佳反應(yīng)溫度為25℃，溫度過(guò)高或過(guò)低將導(dǎo)致檢測(cè)吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。