人粒細(xì)胞趨化蛋白2(GCP-2)酶聯(lián)免疫試劑盒 注意事項(xiàng):
1. 保存:試劑盒中各試劑請(qǐng)按說(shuō)明書(shū)提示合理存放。在儲(chǔ)存及溫育過(guò)程中避免將試劑暴露在強(qiáng)
光中。所有試劑瓶蓋須旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染,否則可能會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。
2. 酶標(biāo)板:剛開(kāi)啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),此為正,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成
任何影響。暫時(shí)不用的板條應(yīng)拆卸后放入備用鋁箔袋,按推薦溫度存放!
3. 加樣:加樣或加試劑時(shí),第一個(gè)孔與后一個(gè)孔的加樣時(shí)間間隔如果太大,將會(huì)導(dǎo)致不同的
“預(yù)溫育”時(shí)間,從而明顯地影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。每次的加樣時(shí)間好控制在
10分鐘內(nèi)。推薦設(shè)置復(fù)孔。
4. 溫育:為防止樣品蒸發(fā),實(shí)驗(yàn)時(shí)必須給酶標(biāo)板覆膜;洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,避免酶標(biāo)
板處于干燥狀態(tài);嚴(yán)格遵守給定的溫育時(shí)間和溫度。
5. 洗滌:洗滌過(guò)程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在吸水紙上拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸
水。在讀數(shù)要注意清除底部殘留的液體和手指印,以免影響酶標(biāo)儀讀數(shù)。
6. 試劑配制:Concentrated Biotinylated Detection Ab及Concentrated HRP Conjugate體積較
小,運(yùn)輸過(guò)程會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋,因此使用1000轉(zhuǎn)/分離心1min,以使附著管壁或瓶
蓋的液體沉積到管底。取用,請(qǐng)用移液器小心吹打4-5次使溶液混勻。標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化抗
體工作液、酶結(jié)合物工作液請(qǐng)根據(jù)所需用量配制,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請(qǐng)
精確配制標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配制(如吸取Concentrated Biotinylated Detection
Ab時(shí),一次不要小于10μL),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成濃度誤差;請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋
過(guò)的標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化抗體工作液、酶結(jié)合物工作液。若需要分次使用標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)按照每一次
用量分裝,將其放在-20~-80℃貯存。避免反復(fù)凍融。
7. 顯色時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如每隔5分鐘),如梯度已很
明顯,請(qǐng)?zhí)峒尤虢K止液終止反應(yīng),避免顏色過(guò)深影響酶標(biāo)儀讀數(shù)。
8. 底物:底物請(qǐng)避光保存,在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
9. 混勻:充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,好使用微量振蕩器(使用低頻率),如無(wú)微量
振蕩器,可在反應(yīng)手工輕輕敲擊酶標(biāo)板框混勻。
10. 安全:試驗(yàn)中請(qǐng)穿著實(shí)驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測(cè)血液或者其他體液樣品
時(shí),請(qǐng)按國(guó)家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條例執(zhí)行。
11. 不同批號(hào)的試劑盒組份不能混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)
12. 試驗(yàn)中所用的EP管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁混用,否則將影響試驗(yàn)結(jié)果!
人粒細(xì)胞趨化蛋白2(GCP-2)酶聯(lián)免疫試劑盒酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。
在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體,②酶標(biāo)記的抗原或抗體,③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋。
48μmol/L 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
24μmol/L 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μmol/L 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μmol/L 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μmol/L 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl 的2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、
待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,
然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 后棄去,如此
重復(fù)5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
10 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止
液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
人粒細(xì)胞趨化蛋白2(GCP-2)酶聯(lián)免疫試劑盒
標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
3. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
4. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
5. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
6. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
7. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
組成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶 8 標(biāo)準(zhǔn)品(96μmol/L) 0.5ml×1 瓶
3 酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說(shuō)明書(shū) 1 份
5 顯色劑A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張
6 顯色劑B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個(gè)
人粒細(xì)胞趨化蛋白2(GCP-2)酶聯(lián)免疫試劑盒
1、采用全進(jìn)口原料和抗體:高效、靈敏、特異,嚴(yán)格引進(jìn)國(guó)際技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行批量生產(chǎn)。
2、先進(jìn)的優(yōu)化方案:重復(fù)性高,可靠性。
3、技術(shù)服務(wù):業(yè),及時(shí),耐心。
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Validated Application: Prevention of Cell Culture Contamination
Agent: Streptomycin, Penicillin
Form: Liquid
Reagent Type: Antibiotic
Concentrated: 100 X
Product Size: 100 mL
Shipping Condition: Dry Ice
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上海篤瑪生物科技有限公司是一家國(guó)內(nèi)合資集科研和生產(chǎn)為一體的專業(yè)化生物公司。專業(yè)提供各類進(jìn)口品牌,研發(fā)生產(chǎn)ELISA試劑盒、細(xì)胞株、抗體、耗材、培養(yǎng)基等產(chǎn)品,并提供實(shí)驗(yàn)外包,技術(shù)指導(dǎo),操作指導(dǎo),代做實(shí)驗(yàn),代做課題等技術(shù)服務(wù)。公司擁有世界一流水平的研發(fā)團(tuán)隊(duì)、領(lǐng)先的技術(shù)、尖端的研發(fā)平臺(tái)及現(xiàn)代化的生產(chǎn)基地,生產(chǎn)各類科研用的產(chǎn)品。 我們由衷的感謝海內(nèi)外科學(xué)家、感謝國(guó)內(nèi)外廣大科研工作者、學(xué)者予以我們鼎力的支持和理解,我們將在未來(lái)的工作中,百尺竿頭,發(fā)揮優(yōu)勢(shì),勇于開(kāi)拓、自主創(chuàng)新、敢為人先、鍥而不舍,在生命科學(xué)的道路上,不斷進(jìn)取,奮發(fā)努力,瞄準(zhǔn)國(guó)際生命科學(xué)的前沿,不斷創(chuàng)新研發(fā)新產(chǎn)品。為科研工作提供更好、更人性化的服務(wù)。