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技術(shù)文章
差速離心方法分離細(xì)胞
點擊次數(shù)：853 發(fā)布時間：2009/2/25 19:48:02
由于實質(zhì)細(xì)胞比非實質(zhì)細(xì)胞的平均體積大10倍左右，所以采用差速離心可以從肝細(xì)胞懸浮液中分離出肝實質(zhì)細(xì)胞，但離心條件應(yīng)嚴(yán)格控制。一般在4℃，低速離心（大約50g）15min就可使實質(zhì)細(xì)胞沉降到管底，通過反復(fù)洗沉淀再離心可以提高實質(zhì)細(xì)胞的純度。如果離心力稍微增加，就會使非實質(zhì)細(xì)胞大量沉降到沉淀里。在550g離心5min，可以回收非實質(zhì)細(xì)胞，它不含實質(zhì)肝細(xì)胞。由于解離出的非實質(zhì)細(xì)胞容易凝聚，該法會丟失大量非實質(zhì)細(xì)胞，其中枯否氏細(xì)胞丟失15%~30%。
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