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技術(shù)文章

實(shí)驗(yàn)常用生物標(biāo)本分離液的配制

點(diǎn)擊次數(shù):455 發(fā)布時(shí)間:2008/12/23 19:18:52

生物技術(shù)領(lǐng)域,醫(yī)用實(shí)驗(yàn)中常常需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分離處理等等,除了需要使用到的實(shí)驗(yàn)器具外,分離液也成為實(shí)驗(yàn)中十分關(guān)鍵不可或缺的部分。

我們就此介紹幾種常見(jiàn)的分離液的配制方法:

1、肌細(xì)胞分離液

配方一:馬克凱郎(Maccallum)液

取1份濃硝酸、2份甘油、3份水,混合后就得到馬克凱郎液。

把新鮮的肌肉組織小塊(橫紋肌、心肌和平滑。┩度敕N溶液里浸漬,分離時(shí)間需1~3日。這種溶液尤其適于分離橫紋肌核心肌細(xì)胞。

配方二:氫氧化鉀溶液

取35克氫氧化鉀,放在100毫升蒸餾水中,加熱,使它完全溶解后,在室溫下冷卻。把新鮮的肌肉組織塊投入氫氧化鉀溶液中,浸泡15~30分鐘后,肌細(xì)胞便可分離。

2、上皮細(xì)胞分離液

配方一:福爾馬林—氯化鉀溶液

稱取58.44克氯化鈉,用蒸餾水溶解,再稀釋到1000毫升,加入2毫升福爾馬林。這種溶液是很好的上皮細(xì)胞分離液,分離很迅速,而且能保護(hù)纖細(xì)的上皮細(xì)胞纖毛。小腸和氣管的上皮組織小塊,放在此溶液里2小時(shí)即可分離,口腔和皮膚上皮組織小塊的細(xì)胞分離一般需3日左右。

配方二:水和氯醛溶液

稱取5克水和氯醛,用蒸餾水溶解,再稀釋到100毫升,就得到5%水合氯醛溶液。從洗凈的動(dòng)物胃、腸和口腔內(nèi)壁上取下上皮組織一小塊,投入以上溶液中,浸泡24~48小時(shí)。

3、神經(jīng)細(xì)胞分離液

配方一:可以用上皮細(xì)胞分離液配方一福爾馬林—氯化鈉溶液來(lái)分離神經(jīng)細(xì)胞。

配方二:硼酸生理鹽水溶液

在生理鹽水溶液內(nèi)加入一些硼酸,攪拌到不再溶解時(shí)為止,使成為飽和溶液。 把脊椎灰質(zhì)和腦皮質(zhì)部位的神經(jīng)組織一小塊投入這種溶液中分離。

4、植物莖細(xì)胞分離液

杰弗里氏(Jeffrey’s)液

取等量的10%鉻酸溶液和10%硝酸溶液混合,成鉻酸—硝酸溶液。

這種溶液用來(lái)分離木本植物莖部的導(dǎo)管、管胞、篩管、伴胞和韌皮纖維等。把材料切成小塊放在水里,加熱煮沸,冷卻后再加熱煮沸。這樣重復(fù)幾次,到材料全部沉于水底后,投入分離液內(nèi),分離時(shí)間是24~48小時(shí)。

5、植物根尖細(xì)胞分離液

配方一:鹽酸—酒精溶液

在1份95%酒精中慢慢的加入1份濃鹽酸,即成鹽酸—酒精溶液,裝瓶密閉保存。 把植物根尖部位截下一小段,投入以上溶液中分離。

配方二:4%鹽酸溶液

配制4%鹽酸溶液。截下植物根尖部位,投入盛有4%鹽酸溶液的小燒杯內(nèi),在60攝氏度溫水中隔水溫?zé)?~2分鐘,使根尖軟而不酥,這時(shí)分離效果。

6、植物纖維分離液

取10克氫氧化鈉(或氫氧化鉀),溶解在90毫升水里,制成10%氫氧化鈉(或氫氧化鉀)溶液,放在瓶里密閉保存。把植物莖縱切成細(xì)條,剪成小段后,投入分離液內(nèi)。

7、植物細(xì)胞質(zhì)壁分離液

配方一:30%蔗糖溶液

取30克蔗糖,溶解在70毫升蒸餾水里,裝瓶備用。

配方二:5%氯化鈉溶液

取5克食鹽,溶解在95毫升蒸餾水里,裝瓶備用。

配方三:5%硝酸鉀溶液

取5克硝酸鉀,溶解在95毫升蒸餾水里,裝瓶備用。

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